青海血蜱幼蜱cDNA表達(dá)文庫的構(gòu)建及其免疫學(xué)篩選.pdf_第1頁
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1、青海血蜱是我國首次命名的一種體外寄生蟲,它除可通過叮咬吸血使宿主生產(chǎn)性能降低外,還可以傳播多種血液原蟲病,嚴(yán)重制約著我國畜牧業(yè)的發(fā)展. 本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建了青海血蜱幼蜱的cDNA表達(dá)文庫,經(jīng)測(cè)定未擴(kuò)增的初級(jí)文庫的庫容量為5.0×10<'5>PFUl,擴(kuò)增后庫容為8×10<'9>PFU/ml;用兔抗青海血蜱幼蜱陽性血清進(jìn)行免疫學(xué)篩選,對(duì)篩選到的陽性噬菌體進(jìn)行亞克隆,提取質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化宿主菌JM109.測(cè)序分析結(jié)果表明:共得到幼蜱陽性克隆11個(gè),分別命

2、名為HqL01、HqL02、HqL03、HqL04、HqL05、HqL06、HqL07、HqL08、HqL09、HqL10、HqL11,通過與已知序列進(jìn)行比對(duì),其中6個(gè)為新基因,將序列HqL07、HqL08、HqL09、HaL11提交至GenBank/NCBI獲取序列號(hào),序列號(hào)分別為EF605263、EF605264、EF605265、EF605266.選擇可能具有較好免疫原性的HqL07、HqL08、HqL09基因進(jìn)行表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物的

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