一個尿道下裂家系致病基因定位和突變分析.pdf

1、尿道下裂是一種男性泌尿生殖系先天畸形疾病，其尿道開口位于陰莖腹側(cè)，陰囊或會陰部，主要臨床特征為尿道外口異位，陰莖彎曲畸形，陰莖背側(cè)包皮堆積等。
　　 根據(jù)開口位置的不同，可將尿道下裂分為陰莖頭型，陰莖型，陰莖陰囊型，陰囊型，和會陰型。目前其發(fā)病率為9.15/104，發(fā)病原因不是十分清楚。對其遺傳病家系研究揭示其致病基因，對該病的發(fā)病機制闡明有重要意義。
　　 研究表明，目前導致尿道下裂致病基因主要為SRY，SOX9，WT

2、-1，SRD5A2，AR，MAMLD1和MID1等。我們收集并鑒定一個尿道下裂的漢族家系，家系先證者主要臨床癥狀為尿道下裂，另外還伴有乳房的發(fā)育，無喉結(jié)，胡須稀少等。為了研究該家系尿道下裂疾病的致病原因，對該家系尿道下裂疾病進行了分子遺傳學的研究。該家系為伴X 染色體連鎖遺傳，首先對X 染色體上已知的三個尿道下裂致病基因AR，MAMLD1和MID1 進行連鎖分析，發(fā)現(xiàn)DXS991和DXS986 微衛(wèi)星標記與該家系尿道下裂疾病共分離，AR

3、在上述兩個微衛(wèi)星標記之間，說明AR基因很可能是該家系的致病基因。進而對該家系先證者AR基因的所有外顯子及外顯子和內(nèi)含子交界處進行直接測序，將測到的序列與正常的AR基因序列進行比對，發(fā)現(xiàn)先證者AR基因的第4 外顯子上存在一個新的錯義突變c.2084C>T，該突變導致第695位的脯氨酸變?yōu)榱涟彼幔╬.Pro695Leu）。該突變產(chǎn)生TaqⅠ酶切位點可以應用限制性片段長度多態(tài)分析驗證該突變是否與家系中疾病共分離，同時在家系外200個正常漢族人

4、驗證該突變是否是SNP。驗證表明該家系中所有患者和攜帶者存在c.2084C>T 突變，而在家系正常人和家系外200個正常漢族人群（100例男性和100例女性）中沒有發(fā)現(xiàn)此突變。對AR蛋白結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)，p.Pro695位于AR配體結(jié)合域（ligand bindingdomain，LBD），該位點從魚到人在進化中高度保守區(qū)，p.Pro695Leu 突變可能影響配體和AR的結(jié)合從而影響與雄性激素結(jié)合和AR蛋白復合體在入核這一過程中的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)