光果甘草和丹參配比提取工藝優(yōu)化及丹參脂溶性成分研究.pdf

1、　　目的：本課題主要對丹參藥材丹參酮IIA、光果甘草藥材光甘草定兩個指標性化學成分分別進行含量測定和藥效學研究,結合含量測定和藥效學結果分別優(yōu)選出兩種藥材的最佳提取方法,為兩種藥材配比提取提供參考依據(jù)；對光果甘草和丹參按一定比例配比混合提取進行研究,并進行比較分析,由含量測定和藥效學結果結合分析確定兩者最佳配比；在確定兩者最佳配比后,進一步優(yōu)選出兩種藥材在最佳配比中的最佳提取部位(不同提取溶劑),由含量測定和藥效學結果結合分析確定兩者最

2、佳提取部位,最終確定兩種藥材在一定配比下用特定的提取溶劑提取出有效成分丹參酮IIA、光甘草定的含量和藥效為最佳結果；通過“一測多評”法以丹參酮IIA為內標,計算丹參中二氫丹參酮I、隱丹參酮、丹參酮I的含量,并與外標法進行比較方法的可行性；對不同包裝儲藏丹參藥材中丹參酮IIA、二氫丹參酮I、隱丹參酮、丹參酮I的含量進行測定,探明丹參藥材在儲藏過程中對其4種成分的影響,從而為丹參儲藏提供科學依據(jù)。
　　方法：通過對丹參和光果甘草兩

3、種藥材的提取方法和溶劑分別進行考察,以指標性成分(丹參酮IIA和光甘草定)的含量高低為指標,結合藥效學實驗結果優(yōu)選出最佳提取工藝；對不同產地丹參和光果甘草按上述確定的提取浸膏方法進行測定選出含量和藥效最佳的產地進行實驗測定；采用兩種藥材不同比例(1：2, 1：1, 2：1)配比進行提取浸膏,以浸膏中丹參酮IIA和光甘草定含量為參考指標,并將浸膏進行藥效研究,指標性成分含量結合其藥效研究結果分析優(yōu)選出兩種藥材最佳配比；在此基礎上進一步對兩

4、種藥材在最佳配比中的提取部位(不同提取溶劑)進行研究,由含量測定和藥效學結果結合分析確定兩者最佳提取部位；通過“一測多評”法以丹參酮IIA為內標,利用相對校正因子計算丹參中二氫丹參酮I、隱丹參酮、丹參酮I的含量,并與外標法進行比較驗證方法的可行性；用不同包裝材料(紙箱、布袋、塑料袋、編織袋和密封袋)與未包裝儲藏丹參藥材,同時測定4種脂溶性成分的含量變化,選出最佳的儲藏條件。
　　通過研究確定了丹參和光果甘草在一定配比下浸膏提取

5、工藝,提取工藝為：精密稱取丹參和光果甘草藥材共 10g(丹參和光果甘草各 5g),置同一圓底燒瓶中加 10 倍量80%乙醇提取2次,每次60min,提取得到樣品液分別過濾,濾液減壓濃縮后轉移至恒重蒸發(fā)皿中,置真空干燥箱中60℃真空干燥至恒重,稱量干膏重,計算干膏得率,所得浸膏按下述方法進行處理：(1)取浸膏,稱其重量約 1g,做藥理試驗,測定其指標性成分(丹參酮 IIA、光甘草定)的活性；(2)稱取浸膏約 0.1g,精密稱定,置 10m

6、l容量瓶中,加入甲醇超聲至完全溶解后,定容至刻度,搖勻,過微孔濾膜,備用,HPLC測定浸膏中指標性成分(丹參酮IIA、光甘草定)的含量；丹參酮IIA的HPLC色譜條件為：RAINBOW Micsphere C18 (250mm×4.6 mm, 5 μm)色譜柱,流動相：甲醇-水 (80：20)；流速：1.0 mL·min-1；柱溫：30 ℃；檢測波長：270 nm。柱溫30℃；光甘草定的HPLC色譜條件為：RAINBOW Micsphe

7、re C18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm)色譜柱,流動相：乙腈-1%冰醋酸溶液(53：47)；流速：1ml·min-1 ；柱溫：30 ℃,檢測波長：280nm；以丹參藥材中4種有效成分為指標性成分,采用校正因子計算二氫丹參酮I、隱丹參酮和丹參酮 I 的含量值與外標法實測值之間無顯著性差異；用不同包裝材料儲藏,考察儲藏時間為 8 個月,對丹參中 4 種有效成分的含量變化研究結果表明,以密封袋包裝為丹參最佳儲藏方式。