牡丹組織培養(yǎng)與快速繁殖.pdf

1、本研究以不同品種牡丹的鱗芽為外植體，探討了不同生長調(diào)節(jié)物質(zhì)和不同環(huán)境因子在鱗芽的萌發(fā)、增殖以及生根過程中的作用，分析不同培養(yǎng)過程中主要影響因子有效濃度的范圍，并進一步對生根試管苗從顯微結(jié)構(gòu)上進行了觀察研究；同時又以中原牡丹品種“鳳丹”幼胚為外植體，初步探討了在牡丹愈傷組織的誘導(dǎo)、增殖分化過程中主要的影響因子及有效范圍濃度，以此建立起牡丹幼胚培養(yǎng)及植株再生體系，為提高其繁殖系數(shù)、加快規(guī)?；缢俣取⑦M一步利用生物技術(shù)對其品種進行改良等研究

2、奠定基礎(chǔ)。結(jié)果如下： 1．以“朱砂壘”磷芽和“海黃”莖段為材料，對牡丹外植體消毒方法進行了研究。結(jié)果表明，70％酒精對牡丹外植體損傷較大，在對牡丹外植體進行消毒處理時，只需要用0.1％HgCl<,2>，根據(jù)取材時間及材料幼嫩程度的不同，牡丹鱗芽消毒時長以8～10min為宜，葉柄以5～8min為佳。 2．以“朱砂壘”、“脂紅”、“映金紅”三個品種的鱗芽為材料，分別比較不同的生長調(diào)節(jié)物質(zhì)(IAA、6-BA、GA<,3>)對三

3、種牡丹鱗芽萌發(fā)的影響，結(jié)果表明：不同的生長調(diào)節(jié)物質(zhì)對不同品種鱗芽萌發(fā)率的影響不同， 6-BA對三個不同品種鱗芽萌發(fā)的影響都比較明顯，低濃度或者不加6-BA的培養(yǎng)基更利于提高牡丹鱗芽的萌發(fā)率，培養(yǎng)基MS+6mmol/L Ca<'2+>+IAA0.5nag·L<'-1>+GA<,3>1.0 mg·L<'-1>比較適合鱗芽的萌發(fā)。 3．把8個不同的品種，即“鳳丹”、“朱砂壘”、“瓔珞寶珠”、“烏龍捧盛”、“洛陽紅”、“映金紅”、“脂紅

4、”和“十八號”的鱗芽分別在相同培養(yǎng)條件下進行誘導(dǎo)培養(yǎng)，結(jié)果表明8個品種之間萌發(fā)率的差異依次為：“朱砂壘”>“脂紅”>“瓔珞寶珠”>“烏龍捧盛”>“映金紅”>“鳳丹”>“十八號”>“洛陽紅”，其中以“朱砂壘”的萌芽率最高，為85％；“洛陽紅”最差，萌芽率僅為25％。 4．利用正交設(shè)計進行朱砂壘試管苗增殖試驗研究，結(jié)果表明GA<,3>和6-BA是“朱砂壘”試管苗增殖過程的重要的生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，同時，附加0.3 mg·L<'-1>的KT

5、可以明顯的提高“朱砂壘”增殖培養(yǎng)的增殖系數(shù)，但當(dāng)附加的KT的濃度達(dá)到0.5 mg·L<'-1>以上時，又會使“朱砂壘”試管苗的增殖受到一定的抑制作用。 5．以“朱砂壘”試管苗為材料，利用正交設(shè)計，進行生根誘導(dǎo)試驗。通過生根系數(shù)、平均根數(shù)及平均根長等生長指標(biāo)研究發(fā)現(xiàn)：單一生長物質(zhì)IBA不能誘導(dǎo)“朱砂壘” 試管苗根的發(fā)生，必須適當(dāng)?shù)母郊覫AA或者ABT才能誘導(dǎo)生根。蔗糖和FA對“朱砂壘”試管苗生根系數(shù)及平均根數(shù)也有顯著的影響

6、作用，并且，F(xiàn)A和IBA的濃度水平對試管苗的平均根長有很大的影響；從生根系數(shù)、平均根數(shù)及平均根長三個指標(biāo)綜合分析，培養(yǎng)基1/2MS+6mmol/LCa<'2+>+IBA2.0mg·L<'-1>+IAA0.5mg·L<'-1>+FA10g·L<'-1>+ABT0.5mg·L<'-1>+蔗糖30g·L<'-1>更有利于“朱砂壘”試管苗根的誘導(dǎo)。 6．以“鳳丹”幼胚為材料，進行牡丹愈傷組織的誘導(dǎo)試驗，比較不用生長調(diào)節(jié)物質(zhì)對牡丹愈傷組

7、織誘導(dǎo)的影響，同時又對牡丹愈傷組織的分化增殖進行了研究。結(jié)果表明：NAA、基本培養(yǎng)基類型及2，4-D是影響幼胚出愈率的重要因素，各因素不同的水平間都有很顯著的差異；MS+6mmol/LCa<'2+>的基本培養(yǎng)基和高濃度的2，4-D更利于愈傷組織的誘導(dǎo)，而NAA濃度以1.5 mg·L<'-1>為宜，過高或者過低的NAA都會對“鳳丹”幼胚的出愈率有明顯的抑制作用；在愈傷組織的增殖分化過程中，KT和6-BA起重要作用，是愈傷組織增殖分化的重要