黃連花種子萌發(fā)及組織培養(yǎng)體系建立.pdf

1、黃連花是報春花科珍珠菜屬的一種多年生野生草本植物，具有良好藥用價值及觀賞價值，同時具有較強的抗寒性，目前對其研究還較少。因此探索該植物高效快速的繁殖方法，對于該植物種質(zhì)資源保存及大規(guī)模醫(yī)藥利用是必要的。本論文以黃連花種子及莖段和葉片為實驗材料，對其種子萌發(fā)適宜條件和組織培養(yǎng)體系建立兩方面進行了研究，研究結(jié)果如下:
　　1.黃連花種子具有休眠特性，未經(jīng)GA3浸泡處理不能夠萌發(fā);同一時期采收的種子，相同時間4℃低溫干燥儲藏比20℃室溫

2、干燥儲藏發(fā)芽效果好;400mg·L-1 GA3浸種24h，30℃光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)，萌發(fā)效果最好，此時發(fā)芽勢、發(fā)芽率、萌發(fā)系數(shù)依次為45.37％、50.93％、2.67。
　　2.黃連花組織培養(yǎng)體系建立中一系列實驗結(jié)果表明:75％酒精30s表面消毒+0.1％HgCl2消毒4min是葉片最好的消毒方法，75％酒精30s表面消毒+0.1％HgCl2消毒10min是莖段最好的消毒方法;黃連花莖段外植體最適宜采集時間是5-6月份;MS+6-B

3、A2.0mg·L-1+IBA0.5mg·L-1適宜莖段初代培養(yǎng)，培養(yǎng)7d誘導(dǎo)出愈傷，誘導(dǎo)率100％，腋芽萌發(fā)率100％，腋芽萌發(fā)指數(shù)5.3個；MS+NAA1.0mg·L-1+6-BA0.5 mg·L-1和MS+NAA1.0mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1都適宜葉片初代培養(yǎng)，愈傷誘導(dǎo)率均為95.56％，培養(yǎng)7d誘導(dǎo)出愈傷;黑暗培養(yǎng)對葉片愈傷誘導(dǎo)和生長有抑制作用;葉基部位最適宜葉片誘導(dǎo)愈傷，遠(yuǎn)軸面（葉背）向下培養(yǎng)比近軸面（葉面）向下

4、培養(yǎng)更有利于葉片愈傷組織誘導(dǎo)。
　　3.MS+6-BA2.5mg·L-1+NAA0.005mg·L-1適宜莖段愈傷分化，分化率和出芽指數(shù)分別為83.33％、6.87個;6-BA(2.0-2.5) mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1+MS能夠獲得最佳莖段愈傷增殖狀態(tài);6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+MS適宜葉片愈傷分化，分化率和出芽指數(shù)分別為74.07％、4.56個;培養(yǎng)基6-BA0.5mg·L-1+N