囊狀幼蟲病毒在中華蜜蜂幼蟲體內(nèi)的增殖規(guī)律研究.pdf

1、蜜蜂囊狀幼蟲病是由囊狀幼蟲病毒（Sacbrood virus）侵染引起蜜蜂幼蟲蛻皮液積累導(dǎo)致幼蟲不能化蛹而死的病毒病。
　　本試驗建立了檢測中華蜜蜂囊狀幼蟲病毒的分子標(biāo)記，對該分子標(biāo)記克隆并測序后與數(shù)據(jù)庫中序列對比，驗證了該分子標(biāo)記的特異性、靈敏性、應(yīng)用性，并將重組質(zhì)粒大量擴增，純化后作為后期熒光定量的標(biāo)準(zhǔn)品；以SYBR Green I熒光定量PCR檢測囊狀幼蟲病毒靈敏度在1×101～4×102copies/μL之間；測得病蟲體內(nèi)

2、病毒含量達到3.0×1016 copies/μL，以飼喂的方式使-80℃保存的囊狀幼蟲病毒侵染中華蜜蜂幼蟲，發(fā)現(xiàn)能使幼蟲發(fā)病，出現(xiàn)明顯的囊狀幼蟲病癥狀，說明-80℃保存3個月可以保持囊狀幼蟲病毒的侵染活性；對中華蜜蜂進行室內(nèi)飼養(yǎng)，化蛹率達到76.0％，之后將病毒加入飼料中對健康幼蟲進行病毒接種，化蛹率為31.3%，利用熒光定量PCR絕對定量方法測定不同時期幼蟲體內(nèi)病毒的絕對濃度，對幼蟲體內(nèi)病毒的增殖情況做出檢測，發(fā)現(xiàn)該病毒在蜜蜂幼蟲體內(nèi)