心理應(yīng)激致亞健康狀態(tài)大鼠模型的建立及藥物干預(yù)作用的研究.pdf

1、目的：限制活動(dòng)導(dǎo)致心理應(yīng)激，形成大鼠亞健康狀態(tài)，觀察亞健康狀態(tài)大鼠一般癥狀、耐力、記憶能力、血?dú)鉅顩r和免疫功能、抗氧化能力、肝腎功能、抗應(yīng)激能力和大腦皮質(zhì)Bax、c-Fos、iNOS表達(dá)的變化，同時(shí)，觀察抗衰老片和六味地黃丸的干預(yù)作用，探討心理應(yīng)激致大鼠的亞健康狀態(tài)及藥物干預(yù)作用的機(jī)制，為心理應(yīng)激形成亞健康的臨床預(yù)防和治療提供參考。
　　方法：取肝腎功能正常的雄性SD大鼠40只，體重為320～360g，按體重隨機(jī)分成4組，即正常對(duì)

2、照組、模型對(duì)照組，抗衰老片組、六味地黃丸組，每組10只，按2只/籠飼養(yǎng)，自由飲食。除正常對(duì)照組外，其它各組每天限制大鼠活動(dòng)3h，形成心理應(yīng)激，建立心理應(yīng)激致亞健康狀態(tài)大鼠模型。在造模同時(shí)，抗衰老片組給予0.30g·kg-1抗衰老片，六味地黃丸組給予0.68g·kg-1六味地黃丸，模型對(duì)照組和正常對(duì)照組均給予蒸餾水10ml·kg-1。試驗(yàn)期間，每日稱重，觀察大鼠的一般癥狀，在試驗(yàn)14d后，各組隨機(jī)取5只大鼠進(jìn)行測(cè)試和處理，剩余5只繼續(xù)造模

3、至21d。在動(dòng)物處理前，進(jìn)行懸尾試驗(yàn)測(cè)定大鼠的耐力和Morris水迷宮法測(cè)試大鼠空間記憶能力，并尾靜脈取血，測(cè)定肝腎功能指標(biāo)；動(dòng)物處死后，經(jīng)腹腔取動(dòng)靜脈血，測(cè)定血?dú)?、電解質(zhì)、IL-2、IFN-γ、CORT、MDA、LD含量和 SOD、GSH-Px活性，測(cè)定胸腺、脾、腎臟、腎上腺和甲狀腺指數(shù)，取脾測(cè)定T、B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和NK細(xì)胞活性，并進(jìn)行腦、心、肝、脾、肺、腎的病理檢查，同時(shí)，測(cè)定腦組織TChE活性、5-HT含量和大腦皮質(zhì)Bax、c-

4、Fos、iNOS表達(dá)。
　　結(jié)果：大鼠被限制活動(dòng)后產(chǎn)生緊張、不安、焦慮等心理應(yīng)激反應(yīng)，并出現(xiàn)體重增重緩慢，反應(yīng)遲鈍、毛發(fā)光澤差和易應(yīng)激、緊張等亞健康狀態(tài)的癥狀，并隨造模時(shí)間的延長(zhǎng)，癥狀逐漸明顯。而給予抗衰老片和六味地黃丸組大鼠的體重增加緩慢程度和亞健康狀態(tài)癥狀明顯減輕。造模14d、21d后指標(biāo)檢測(cè)，①耐力和空間記憶力測(cè)定結(jié)果，模型對(duì)照大鼠的掙扎次數(shù)明顯減少、靜止時(shí)間、游泳路程和搜索平臺(tái)的潛伏期明顯延長(zhǎng)（P<0.05，P<0.01）

5、；給予抗衰老片和六味地黃丸后，大鼠的掙扎次數(shù)明顯增多、游泳路程顯著縮短（P<0.05），且靜止時(shí)間和搜索平臺(tái)的潛伏期縮短的趨勢(shì)（P>0.05）。②血?dú)怆娊赓|(zhì)測(cè)定結(jié)果，模型對(duì)照大鼠血液PH值、PO2、SO2、PO2/FI、血Ca++均明顯降低和PCO2、血K+明顯升高（P<0.05，P<0.01），而血Na+、Mg++無(wú)明顯變化（P>0.05）；給予抗衰老片和六味地黃丸后，均能顯著升高PH值、PO2、SO2和降低 PCO2、PO2/FI比

6、值（P<0.05）。③模型對(duì)照大鼠的T、B脾淋巴細(xì)胞增殖能力和NK細(xì)胞活性明顯下降（P<0.05，P<0.01）；血清 IL-2、IFN-γ含量均顯著降低（P<0.05）；給予抗衰老片和六味地黃丸后，顯著提高大鼠T、B脾淋巴細(xì)胞增殖能力、NK細(xì)胞活性和血清IL-2的含量（P<0.05）。④模型對(duì)照大鼠血清、腦組織 SOD活性和血清 GSH-Px活性明顯降低（P<0.05，P<0.01），血清和腎組織MDA明顯升高（P<0.05）；而給予

7、抗衰老片后顯著提高大鼠血清、腎組織SOD、GSH-Px活性和降低血清MDA、LD含量（P<0.05，P<0.01），六味地黃丸組能顯著提高腎組織SOD活性（P<0.05）。⑤模型對(duì)照大鼠血清CORT顯著升高（P<0.05），腦組織 TChE活性和5-HT含量明顯升高（P<0.05）；給予抗衰老片和六味地黃丸后，均可顯著降低大鼠血清CORT和腦組織5-HT、TChE活性。⑥模型對(duì)照大鼠的肝腎功能指標(biāo)未見(jiàn)明顯變化（P>0.05），且腦、心、

8、肝、脾、肺、腎等臟器亦未見(jiàn)明顯病理變化，但胸腺、脾臟和甲狀腺等指數(shù)均明顯下降和腎臟指數(shù)明顯升高（P<0.05）；給予抗衰老片和六味地黃丸后，對(duì)肝腎功能指標(biāo)和臟器的組織形態(tài)學(xué)均無(wú)明顯影響，但抗衰老片可顯著提高大鼠甲狀腺、胸腺等指數(shù)（P<0.05，P<0.01），六味地黃丸組可顯著提高甲狀腺指數(shù)（P<0.05）。⑦模型對(duì)照大鼠大腦皮質(zhì)的Bax、c-Fos、iNOS表達(dá)明顯增加（P<0.01）；給予抗衰老片能顯著降低大鼠的大腦皮質(zhì) Bax、c

9、-Fos的表達(dá)（P<0.05，P<0.01），六味地黃丸可顯著降低大鼠大腦皮質(zhì)的iNOS陽(yáng)性表達(dá)面積。
　　結(jié)論：連續(xù)每日限制活動(dòng)3h可使大鼠產(chǎn)生心理應(yīng)激，導(dǎo)致大鼠體重增重緩慢、反應(yīng)遲鈍、耐力和空間記憶力下降等亞健康狀態(tài)癥狀的形成。亞健康狀態(tài)大鼠肝腎功能正常，但體內(nèi)血?dú)鉅顟B(tài)下降、酸堿平衡和電解質(zhì)紊亂，機(jī)體的免疫功能、抗氧化和抗應(yīng)激能力降低；臟器組織無(wú)明顯病理學(xué)改變，但部分臟器指數(shù)發(fā)生改變，并出現(xiàn)腦組織TChE活性和5-HT含量升高