烏司他丁對兔髓核細(xì)胞中iNOS及MMP-2、3表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　 本課題以兔椎間盤髓核細(xì)胞為研究對象,并用IL-1β對髓核細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)。后測定髓核細(xì)胞中iNOS及MMP-2、3的表達(dá),探討不同濃度的烏司他丁對白介素-1β誘導(dǎo)的兔腰椎間盤髓核細(xì)胞中iNOS及MMP-2、3表達(dá)的影響,為烏司他丁運(yùn)用于臨床緩解椎間盤退變以及退變所導(dǎo)致的疼痛等提供了一定思路。
　　 方法:
　　 用酶消化法提取兔椎間盤髓核細(xì)胞并進(jìn)行體外培養(yǎng);用HE染色法及Ⅱ型膠原免疫細(xì)胞化學(xué)染色法對兔椎

2、間盤髓核細(xì)胞進(jìn)行鑒定;將兔髓核細(xì)胞隨機(jī)分為6組:正常對照組、烏司他丁對照組(加入320U/ml烏司他丁)、白介素1β誘導(dǎo)組(加入10ng/ml IL-1β)和3個(gè)不同濃度烏司他丁抑制組(加入IL-1β的同時(shí),分別加入160U/ml、320U/ml和640U/ml烏司他丁)。作用48h后用細(xì)胞免疫組化法檢測各組細(xì)胞中MMP-2、3表達(dá)變化,并用分光光度法檢測各組培養(yǎng)液中iNOS活性。
　　 結(jié)果:
　　 HE染色及Ⅱ型膠原

3、免疫細(xì)胞化學(xué)染色法表明所提取細(xì)胞為正常兔椎間盤髓核細(xì)胞。細(xì)胞免疫組化檢測提示正常對照組對iNOS及MMP-2、3的表達(dá)呈弱陽性,烏司他丁對照組與正常組相比表達(dá)有下降:誘導(dǎo)組iNOS及MMP-2、3的表達(dá)呈強(qiáng)陽性;各抑制組MMP-2、3表達(dá)均低于誘導(dǎo)組(P＜0.01),且其表達(dá)降低的程度與藥物的處理濃度呈正比;各抑制組iNOS含量均低于誘導(dǎo)組,以320U/ml抑制組最顯著(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 在體外條件下