越橘品種“l(fā)egacy”四倍體誘導(dǎo)的初步研究.pdf

1、越橘，又稱(chēng)藍(lán)莓、藍(lán)漿果，為杜鵑花科（Ericaceae），越橘屬（Vaccinium L.）多年生常綠或者落葉類(lèi)灌木，原產(chǎn)于北美地區(qū)。果實(shí)為藍(lán)色或紅色漿果，具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值，富含多種維生素、微量元素及花青素、黃酮等生理活性成分;果實(shí)味道鮮美、口感較好，深受人們的喜愛(ài)。越橘株高因品種不同而異，單葉互生，根系分布較淺，對(duì)土壤選擇性強(qiáng)，嗜酸性土壤，pH4.3-5.5為宜，多生于高山濕潤(rùn)的針葉林下或針葉闊葉混合林下、灌木叢、有苔蘚的

2、水甸或濕地，喜光樹(shù)種。
　　目前我國(guó)北方栽培的越橘品種和面積均較南方多，適應(yīng)我國(guó)南方氣候特點(diǎn)的南高叢越橘品種大多果實(shí)較小，部分品種長(zhǎng)勢(shì)較旺。具有北高叢和南高叢遺傳物質(zhì)的越橘品種‘legacy’果實(shí)中大，口感較好，可鮮食和加工?！甽egacy’已引進(jìn)重慶并適應(yīng)性栽培數(shù)年，表現(xiàn)出抗病性中等、長(zhǎng)勢(shì)中庸、果實(shí)較大品質(zhì)較好等特點(diǎn)。
　　本研究以越橘栽培品種‘legacy’莖段為外植體，研究低溫預(yù)處理對(duì)建立離體快繁體系中污染率及存活率的

3、影響，篩選初代培養(yǎng)基的ZT濃度，并利用秋水仙素處理對(duì)‘legacy’組培苗進(jìn)行誘變，確定最佳處理濃度和處理時(shí)間。通過(guò)形態(tài)觀察及染色體計(jì)數(shù)對(duì)所獲得的變異株進(jìn)行倍性鑒定，獲得植株均為嵌合體，并對(duì)嵌合體進(jìn)行嵌合體分離，以期獲得較為純合的四倍體植株。將嵌合體植株和二倍體植株的形態(tài)、細(xì)胞學(xué)及生理指標(biāo)進(jìn)行差異顯著性分析，為今后培育生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)、抗性強(qiáng)的越橘品種提供基礎(chǔ)研究數(shù)據(jù)。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　1.低溫預(yù)處理可有效降低污染率，增

4、加存活率。外植體消毒最佳組合:4℃預(yù)處理1d后75％酒精消毒20s，0.15％HgCl2消毒8min，污染率為26.7％，存活率為66.7％
　　2.初代培養(yǎng)基中添加低濃度ZT有助于莖段腋芽萌動(dòng)，增加成枝數(shù);高濃度ZT抑制莖段腋芽萌發(fā)，延緩成枝生長(zhǎng)，甚至死亡。本試驗(yàn)最佳初代培養(yǎng)基為改良的WPM培養(yǎng)基中添加0.75mg/L的ZT。
　　3.采用浸漬法對(duì)越橘‘legacy’莖尖進(jìn)行離體誘導(dǎo)能得到變異株，以0.10％秋水仙素溶液處

5、理變異率相對(duì)較高，處理24h形態(tài)變異率為16％，變異率為10％，誘導(dǎo)效果最佳。誘變產(chǎn)生的變異株經(jīng)染色體計(jì)數(shù)表明，越橘‘legacy’四倍體染色體數(shù)目為2n=4x=48;二倍體染色體數(shù)目為2n=2x=24。變異株均為嵌合體，變異株中多倍體細(xì)胞的比例最高為49.06％。
　　4.浸漬法誘導(dǎo)越橘‘legacy’莖尖時(shí)發(fā)現(xiàn)，在0.05％秋水仙素處理莖尖24h后，少數(shù)組培苗分枝能力、增殖系數(shù)顯著增加，細(xì)胞學(xué)研究發(fā)現(xiàn)其變異率并未提高。將這些植

6、株繼代四代后，增殖系數(shù)分別為6.38、6.66、6.68、6.78，且生長(zhǎng)勢(shì)旺盛，此現(xiàn)象并未隨著繼代次數(shù)的增加而衰減。移栽后植株表現(xiàn)出生長(zhǎng)勢(shì)及分枝能力增強(qiáng)、葉著生方式改變的現(xiàn)象，株高、分枝量分別增加了10.93％、150％，均與對(duì)照株呈極顯著差異。
　　5.對(duì)變異株與對(duì)照株進(jìn)行形態(tài)特征和解剖學(xué)的比較，對(duì)變異株與對(duì)照株進(jìn)行形態(tài)特征和解剖學(xué)的比較，發(fā)現(xiàn)變異株形態(tài)上表現(xiàn)出典型的器官巨大性、葉色變深、莖頂端及葉表皮毛增多等特征，變異株的莖

7、直徑、葉寬、葉長(zhǎng)、葉厚分別是對(duì)照株的141.50％、170.00％、105.72％、124.11％;保衛(wèi)細(xì)胞增大、氣孔數(shù)目減少、柵欄組織和海綿組織增厚，分別為對(duì)照株的152.2％、149.5％、219.7％、143.4％，均呈極顯著差異。植株形態(tài)特征和解剖學(xué)上的變化可作為鑒別二倍體與多倍體的重要性狀。
　　6.通過(guò)比較變異株與對(duì)照株的部分生理特性，發(fā)現(xiàn)變異株中可溶性糖、葉綠素含量增加分別增加了11.42％、14.29％;丙二醛含量