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1、電化學阻抗免疫傳感器是通過檢測修飾電極的界面特性來檢測樣品中抗體/抗原目標物的一種有效方法。電化學阻抗免疫傳感技術(shù)結(jié)合了電化學阻抗的高靈敏性和免疫反應的高特異性,可響應修飾有生物分子的電極界面的電子轉(zhuǎn)移速率的信號變化,以簡便、快速、靈敏、響應范圍廣、不用示蹤標記物、不需樣品純化、可進行自動化實時數(shù)據(jù)輸出等優(yōu)點,突破了以往分析方法的諸多瓶頸,在生化檢驗方面顯示出誘人的應用前景。本論文一方面利用親和素生物素放大建立了一種高靈敏的電化學免疫阻
2、抗傳感技術(shù);另一方面結(jié)合納米生物修飾技術(shù),設計一系列免疫活性材料固定化新方法,探索臨床重大疾患干燥綜合癥B (anti-Sjogren’s syndrome B)的傳感診斷新技術(shù)。具體內(nèi)容包括:
(1)將巰基苯胺(p-aminobenzenthiol,p-ABT)組裝于金電極表面,進而電聚合形成穩(wěn)定、致密、有序的 p-ABT 納米復合膜界面,固定功能化的碳納米管后,再通過引入親和素-生物素放大系統(tǒng),將生物素化羊抗人IgG固
3、定于電極表面,用以檢測hIgG,建立了一種高靈敏的電化學免疫阻抗傳感器,獲得傳感器的線性范圍為 0.01~100 ng/Ml,檢測下限為0.0075 ng/Ml。
(2)首次在玻碳電極上自組裝羥基磷灰石/碳納米管復合物,制備了檢測干燥綜合癥B (anti-Sj?gren’s syndrome B)抗體的阻抗傳感器。結(jié)果表明,具有生物相容性的羥基磷灰石和電子轉(zhuǎn)移載體的碳納米管的羥基磷灰石/碳納米管的復合物便于免疫電化學特別是
4、阻抗的檢測。利用本文制作的傳感器對抗干燥綜合癥B抗體檢測的線性范圍是稀釋比1:800~1:50,檢測下限為1:853,為了檢驗傳感器的實用性,進行了回收率實驗,結(jié)果令人滿意。該免疫傳感方法有望成為的臨床自身免疫疾病中的檢測自身抗體新的替代方法。
(3)采用電聚合羥基磷灰石(Hydroxyapatite)和膠原蛋白表面形成納米復合物層用于介導抗體在玻碳電極表面的固定化。以羊抗人IgG抗體-抗原體系為測試模型,采用該方法固定了
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