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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:制備出含碳納米管(carbonnanotubes,CNTs)的PLGA電紡纖維材料,并探討碳納米管固體成分對(duì)于納米纖維材料在微觀形貌、直徑分布、孔隙率和力學(xué)性能方面產(chǎn)生的影響,觀察神經(jīng)細(xì)胞在材料上的生長(zhǎng)情況,并向支架體系中加入中藥梓醇,探討含碳納米管纖維材料在負(fù)載中藥體外誘導(dǎo)人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(adipose-derivedmesenchymalstemcells,AMSC)神經(jīng)向誘導(dǎo)分化的作用。
方法:本實(shí)驗(yàn)分三部分進(jìn)
2、行:(1)通過(guò)制備單成分PLGA高分子材料,確定微觀形貌光滑且連續(xù)無(wú)串珠的電紡工藝條件,再基于這些工藝條件,向15%PLGA的電紡纖維中加入碳納米管成分,制備出0.1%,0.2%,0.3%,0.5%,0.7%,1%六種不同濃度碳納米管纖維,掃描電鏡觀察所制材料表面微觀形貌。(2)利用不同軟件對(duì)制備出的不同濃度CNTs材料掃描電鏡圖片進(jìn)行纖維直徑分布(ImageJ),孔隙率(Origin9.0)分析。將材料裁剪至5×1cm的長(zhǎng)條在inst
3、ron5948力學(xué)拉伸檢測(cè)儀上進(jìn)行拉伸破壞實(shí)驗(yàn),通過(guò)得到的楊氏模量、極限應(yīng)變、屈服強(qiáng)度3個(gè)物理量對(duì)包括15%單成分PLGA纖維在內(nèi)的7種材料進(jìn)行力學(xué)描述。(3)將提取的大鼠腦皮層神經(jīng)細(xì)胞種植于6種不同濃度碳納米管纖維材料上,在1d,4d,8d三個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別進(jìn)行了calcein-PI活細(xì)胞染色,β-tubulinⅢ-GFAP免疫熒光復(fù)合染色,觀察種植在材料表面神經(jīng)細(xì)胞的生存情況。向材料中加入中藥梓醇后,將第4代AMSC接種于載藥纖維表面,
4、誘導(dǎo)4天后進(jìn)行β-tubulinⅢ以觀察其神經(jīng)向誘導(dǎo)情況。
結(jié)果:1.確定了制備表面光滑,連續(xù)的單成分納米纖維材料的電紡工藝參數(shù)即負(fù)載電壓15kv,接收距離10cm,溶液流速1ml/h,PLGA溶液濃度15%;2.向15%濃度PLGA纖維中混紡法加入0.1%,0.2%,0.3%,0.5%,0.7%,1%濃度的碳納米管成分也可以制備出纖維結(jié)構(gòu)材料;3.低濃度組(0.1%,0.2%)碳納米管被承載于單根纖維中,增加了纖維直徑分布和
5、孔隙率,抗外力力學(xué)性能增強(qiáng);中濃度組(0.3%,0.5%)中碳納米管進(jìn)入了纖維中的碳?jí)K結(jié)構(gòu),材料整體直徑下降,孔隙率降低,材料力學(xué)抗性下降;高濃度組(0.7%,1%)中碳?jí)K結(jié)構(gòu)增多,蛛網(wǎng)結(jié)構(gòu)形成,纖維間粘連導(dǎo)致纖維直徑增加,孔隙率升高,材料力學(xué)性能下降但彈性增強(qiáng);4.低濃度組不適合神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng);中濃度組材料可以使神經(jīng)細(xì)胞初期黏附生長(zhǎng)正常,但不能生長(zhǎng)至8天神經(jīng)元成熟;高濃度組材料可以承載神經(jīng)細(xì)胞并使其正常生長(zhǎng),且不妨礙神經(jīng)膠質(zhì)
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