EPO對大鼠肝硬化引起心肌損傷的干預作用.pdf

1、目的:觀察EPO干預對大鼠肝硬化引起心肌損傷的影響,并分析心肌TGF-β1在其中的作用。采用CCL4復合因素法建立肝硬化大鼠模型,觀察心功能變化及心肌纖維化的發(fā)生,測定心肌TGF-β1的改變,初步探討EPO對肝硬化誘導心肌損傷的作用機制,為臨床改善和預防肝硬化心肌病的并發(fā)癥提供一定的實驗依據(jù)。
　　方法:雄性SD大鼠36只,隨機分為3組,(1)正常對照組(normal組,n=10),腹部皮下注射等量的生理鹽水,給予正常飼料和自來水

2、。(2)肝硬化模型組(livercirrhosis,LC組,n=13),采用CCl4復合因素建立肝硬化大鼠模型:肝硬化組第一天腹部皮下注射0.5ml/100gCCl4原溶液,以后每周2次注射40％CCl4油溶液0.3ml/100g,單純玉米面(前2周為20%豬油混入)混入0.5%膽固醇,30%酒精為其唯一飲料,共8周建立肝硬化模型。(3)肝硬化+促紅細胞生成素干預組(LC+EPO干預組,n=13),模型建立方法同LC組,建模第5周時腹腔

3、注射重組人促紅細胞生成素(rhEPO)2000IU/kg,每周2次,共4周至實驗結束。造模結束大鼠給予4%水合氯醛1ml/100g麻醉后氣管插管,左心室插管觀察左心室峰壓(leftventricularsystolicpressure,LVSP),左心室內(nèi)壓最大上升和下降速率(maximalrise/fallrateofleftventricularpressure,±dp/dtmax)等指標;測血清中乳酸脫氫酶(lactatedehy

4、drogenase,LDH),肌酸激酶同工酶(creatinekinaseisoenzyme,CK-MB)水平;ELISA法測血清IL-6水平;部分心肌組織標本多聚甲醛固定,石蠟包埋切片進行HE染色及Masson染色觀察組織結構改變和膠原生成改變;逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)檢測各組心肌組織中TGF-β1,ColⅠmRNA基因表達的變化。

5、>　　結果:
　　(1)心體比:與normal組相比,LC組和LC+EPO干預組心體比明顯增高(p<0.01);與LC組相比,LC+EPO干預組心體比顯著降低(p<0.01);
　　(2)心室動力學改變:與normal組相比,LC組左心室收縮峰壓,左心室內(nèi)壓最大上升和下降速率下降明顯(p<0.01);與LC組相比,LC+EPO干預組明顯促進了左心室收縮峰壓、左心室內(nèi)壓最大上升和下降速率的恢復(p<0.05);
　　(3

6、)血清LDH、CK-MB含量:與normal組相比,LC組LDH、CK-MB含量顯著增高(p<0.01),與LC組相比,EPO干預后血清LDH、CK-MB含量明顯降低(p<0.05),但高于normal組(p<0.05);
　　(4)血清IL-6水平改變:與normal組相比,LC組IL-6水平顯著增高(p<0.01),與LC組相比,LC+EPO干預組血清IL-6水平含量顯著降低(p<0.01);
　　(5)組織病理學改變:

7、HE及Masson染色結果顯示,normal組肌纖維結構正常,少有間質(zhì)細胞增多,LC組肌纖維走向紊亂無序,肌絲斷裂、萎縮,有膠原沉積現(xiàn)象,LC+EPO組有明顯改善;
　　(6)RT-PCR檢測心肌組織中TGF-β1mRNA、ColⅠmRNA變化:與normal組相比,LC組心肌組織TGF-β1mRNA水平上調(diào)(p<0.01),ColⅠmRNA水平上調(diào)(p<0.01),與LC組相比,LC+EPO組TGF-β1mRNA水平下調(diào)(p<0