單雙倍體酵母細胞對乙醇響應(yīng)的比較脂組學研究.pdf

1、本文選用釀酒酵母為模型，分別考察二倍體酵母拆孢體系中單倍體α型、單倍體a型和二倍體α/a型釀酒酵母細胞在發(fā)酵過程中對不同乙醇濃度的響應(yīng)情況。應(yīng)用LC-ESI-MSn和GC-TOF-MS高通量檢測手段分別對酵母細胞的磷脂和固醇分子進行定性定量研究，初步建立釀酒酵母細胞的磷脂分子圖庫，從脂質(zhì)組學角度系統(tǒng)分析0％、3％、7％起始乙醇濃度下的上述三種細胞的磷脂和固醇分子組成的變化，采用主成分分析法(PCA)和分層聚類分析法(HCA)對不同體系的

2、磷脂分子進行多元統(tǒng)計分析，尋找潛在的脂生物標志物/群。
　　 發(fā)酵動力學研究表明：二倍體α/a型酵母和單倍體α型酵母的生長速率、葡萄糖消耗速率相近，而單倍體a型酵母明顯比上述兩種類型的酵母的耗糖速率減緩，生長滯后1h。脂組學手段檢測到130種磷脂分子和4種固醇，并對117種磷脂分子進行了定量分析。結(jié)果表明：酵母細胞中含有C18和C16的中長碳鏈的不飽和磷脂比例升高，說明酵母細胞通過增加合成長鏈脂肪酸，提高不飽和磷脂比例來增加對乙

3、醇的耐受性和適應(yīng)性。推測PC含量增加而PA含量減少的原因可能是由于磷脂酶D(PLD)受到乙醇的抑制，活性降低，導致了PC分子的積累和PA分子的減少。
　　 PCA統(tǒng)計分析顯示：不同乙醇濃度和酵母細胞類型影響酵母磷脂代謝并表現(xiàn)出明顯的代謝差異。六大類磷脂中PS、PC、PE、PI的變化尤為明顯，推斷PS34：1、PS34：2、PC32：1、PC32：0、PC32：2、PC34：1、PC34：2、PE32：1、PE32：2、PE34：

4、3、PE34：1、PE34：2、PI26：0、PI26：1、PI32：1、PI32：2、PI34：0、PI34：1、PI34：2、PI36：0，可能是四類重要的脂生物標志物(群)，在對乙醇的耐受機制上起關(guān)鍵作用，可以提高細胞對乙醇的耐受性和適應(yīng)性。分層聚類結(jié)果表明：較低的乙醇濃度下，細胞的磷脂代謝差異主要受不同細胞類型的影響；而當乙醇濃度較高時，乙醇作為主要因素影響細胞磷脂代謝。二倍體α/a型酵母細胞與單倍體α型酵母細胞對乙醇響應(yīng)的磷脂