2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、膠質(zhì)瘤為顱內(nèi)最常見的惡性腫瘤,其發(fā)病率約占顱內(nèi)腫瘤的46%左右,根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)可分為I-IV級,其中IV級中預后最差的病理分型的是膠質(zhì)母細胞瘤(Glioblastoma multiforme,GBM)?;颊咦匀徊〕潭嘣诎肽暌詢?nèi)。且經(jīng)過手術(shù)、放化療以及免疫靶向治療,患者中位生存期沒有明顯延長。
  MicroRNA(miRNA)分子作為一種可以通過靶向作用于多個靶基因而又同時被多個基因作為共同的靶標的分子,普遍存在于動植

2、物體內(nèi)的內(nèi)源性非編碼的小分子RNA,其在生命活動中起到了多種作用。MiRNA通過特異的互補識別位點在轉(zhuǎn)錄后一直靶基因的翻譯,或者降解調(diào)節(jié)下游基因的表達水平。膠質(zhì)瘤作為最致命的顱內(nèi)惡性腫瘤之一,其中也存在microRNA表達譜異常。以往研究表明多種microRNA亞型與已知的膠質(zhì)瘤主要的相關(guān)信號通路相關(guān),即microRNA的異常表達參與了膠質(zhì)瘤的生長和侵襲。同時,外源性的把microRNA分子人為導入膠質(zhì)瘤細胞,可以有效糾正相關(guān)micro

3、RNA亞型表達下調(diào)的相關(guān)表型,為利用microRNA進行外源性導入治療腦膠質(zhì)提供了重要依據(jù)。
  MiR-101在以往文獻的研究中表明:miR-101低表達與膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展呈正相關(guān)關(guān)系,并且低表達miR-101的肝癌患者的生存率較低。有報道表明,miR-101能夠直接抑制EZH2和c-Myc的表達,進而抑制膠質(zhì)瘤細胞的增殖于侵襲。在臨床患者,膠質(zhì)瘤的術(shù)后差和復發(fā)率高于腫瘤其本身的高侵襲性有關(guān),miR-101在以往的研究中參與影

4、響膠質(zhì)瘤的侵襲和和增殖性,但具體的下游作用分子到目前還沒有完全弄清楚,所以在膠質(zhì)瘤中研究miR-101與其腫瘤的高侵襲性的關(guān)系的具體機制變得十分重要。
  本研究中,我們通過文獻回顧和相關(guān)軟件的生物信息學分析,我們將研究放在miR-101與膠質(zhì)瘤細胞的增殖、侵襲肝癌細胞轉(zhuǎn)移的關(guān)系上。首先,為研究miR-101與膠質(zhì)瘤細胞增殖、侵襲的關(guān)系,我們通過qRT-PCR檢測臨床腫瘤和正常腦組織標本中miR-101的表達水平;同時利用過表達m

5、iR-101的慢病毒感染U87、U251膠質(zhì)瘤細胞系,構(gòu)建過表達miR-101的穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系。通過MTT實驗、劃痕實驗、Transwell實驗、裸鼠成瘤實驗分析了miR-101對于膠質(zhì)瘤的體內(nèi)、外的影響;其次,為明確miR-101抑制膠質(zhì)瘤增殖、遷移的分子機制,運用分子克隆技術(shù)檢測結(jié)合文獻和靶基因預測軟件分析的靶基因的3’UTR區(qū)域,并將其連接到pGL3-Control的報告載體上。同時利用熒光素酶報告基因?qū)嶒?、Western blot及

6、qRT-PCR等多種方法證實SOX9在膠質(zhì)瘤中是miR-101調(diào)控的直接靶基因進行驗證。同時應用慢病毒技術(shù)構(gòu)建了干涉轉(zhuǎn)錄因子SOX9表達的穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系。應用通過MTT實驗、劃痕實驗、Transwell實驗等分析SOX9對于膠質(zhì)瘤細胞表型影響;
  通過結(jié)果分析發(fā)現(xiàn),qRT-PCR分析結(jié)果證明膠質(zhì)瘤標本中的miR-101的表達水平較正常腦組織明顯降低;慢病毒感染U87、U251膠質(zhì)瘤細胞后miR-101的表達水平明顯升高;MTT實驗顯

7、示過表達miR-101促進膠質(zhì)瘤細胞增殖、遷移的能力;裸鼠皮下成瘤實驗證明過表達miR-101可以有效抑制裸鼠皮下成瘤的能力;熒光素酶報告基因?qū)嶒?、Western blot及qRT-PCR實驗證明SOX9確實為miR-101的下游調(diào)控的直接靶基因;利用慢病毒技術(shù)構(gòu)建干涉轉(zhuǎn)錄因子SOX9的穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系,Western blot及qRT-PCR實驗證明了干涉SOX9可以有效降低膠質(zhì)瘤細胞的增殖和侵襲。
  綜上所述,我們認為在膠質(zhì)瘤中存

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