吡格列酮對RANKL聯(lián)合M-CSF體外誘導(dǎo)的人破骨樣細(xì)胞MMP-9mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討吡格列酮 (pioglitazone)對核因子NF-κB受體激活劑配體(receptor activator of NF-κB ligand，RANKL)聯(lián)合巨噬細(xì)胞集落刺激因子(macrophage-colony stimulating factor，M-CSF)誘導(dǎo)的人破骨樣細(xì)胞(osteoclast-like cells，OLCs) 基質(zhì)金屬蛋白酶-9 (matrix metalloproteinase-9，MMP-9)

2、 mRNA表達(dá)的影響。
　　 方法：從人外周血以密度梯度離心法分離出單個(gè)核細(xì)胞貼壁培養(yǎng)，之后以RANKL(50 ng/mL)聯(lián)合M-CSF(25ng/mL)進(jìn)行誘導(dǎo)。14天后使用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法以及掃描電鏡觀察骨片以鑒定細(xì)胞是否具有破骨細(xì)胞的特征。誘導(dǎo)成功后再使用不同濃度的吡格列酮(0，10-5，10-6，10-7mol/l)繼續(xù)干預(yù)培養(yǎng)48小時(shí)，之后收集各組細(xì)胞，使用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)的方法

3、檢測各組MMP-9 mRNA的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：(1) RANKL聯(lián)合M-CSF誘導(dǎo)生成的細(xì)胞形態(tài)具備破骨細(xì)胞的特征，抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP) 染色陽性,具有在骨片上形成骨吸收陷窩的能力。(2) RT-PCR檢測結(jié)果顯示：人破骨樣細(xì)胞能夠表達(dá)MMP-9 mRNA。(3)在各濃度吡格列酮(10-5，10-6，10-7mol/l) 干預(yù)培養(yǎng)48小時(shí)后，MMP-9 mRNA表達(dá)均較空白對照組顯著下降(P<0.01)，各不