枇杷葉化學對照品的研究.pdf

1、我國擁有豐富的藥用植物資源，近年來在全世界范圍內(nèi)興起了用天然藥用植物來預防和治療各種疾病的熱潮，但是長期以來人們對于多種藥用植物的有效成分、藥理和藥效的理解和把握還不甚清楚，藥用植物鑒定及其質(zhì)量控制還不完善。因此系統(tǒng)分析藥用植物的化學成分，闡明有效部位和活性成分，建立全面反映所含活性成分的植物鑒定和質(zhì)量控制依據(jù)，使傳統(tǒng)藥用植物被世界所認同和接受，已經(jīng)成為中醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)面臨的重要課題。 枇杷葉為薔薇科常綠小喬木植物枇杷[Eriobot

2、rya japonica(Thunb)Lindl]的干燥葉，在我國分布廣泛，主產(chǎn)于廣東、江蘇、浙江、福建、湖北等地。枇杷葉是傳統(tǒng)醫(yī)藥學常用中草藥，藥用歷史悠久，具有潤肺止咳、降逆止嘔之功效，常用于治肺熱咳嗽，吐血、胃熱逆嘔，煩熱口渴等疾病<'[1]>。 現(xiàn)代藥理學研究表明枇杷葉具有抗炎、止咳作用，臨床常用于治療急慢性呼吸道等疾病。近年研究還發(fā)現(xiàn)，枇杷葉有抗腫瘤、抗病毒、降血糖、保肝利膽、清除氧自由基、增強機體免疫功能等作用。藥物

3、化學研究表明：枇杷葉中主要含有揮發(fā)油、三萜類、倍半萜類、．黃酮類、氨基酸、糖類、及其他有機酸類等化學成分<'[2]>。枇杷葉雖為常用中草藥，但是2005版藥典只收載性狀和組織顯微鑒別，尚無生物活性成分以及化學標準品的含量測定和定性檢查，缺乏科學依據(jù)。因此作者對枇杷葉中藥材進行了化學成分、HPLC指紋圖譜和化學對照品的研究。 本實驗分別對枇杷葉采用了乙醇提取和CO<,2>超臨界萃取兩種提取方法得到浸膏。對乙醇提取物經(jīng)過溶劑梯度萃取

4、后的乙酸乙酯萃取物和CO<,2>超臨界萃取物分別進行硅膠柱層析，得到8種已知化合物，并確定了化合物的結(jié)構(gòu)。而后采用HPLC方法，選用10種不同產(chǎn)地的枇杷葉藥材對其進行了初步的HPLC指紋圖譜方法學研究，建立了枇杷葉的HPLC指紋圖譜測定方法，便于比較枇杷葉各產(chǎn)地之間的相關(guān)性，同時建立了枇杷葉中熊果酸的HPLC含量測定方法，從而為枇杷葉藥材的品質(zhì)評價、質(zhì)量標準制定提供依據(jù)。 實驗結(jié)果表明：(一)采用反復的硅膠柱層析對乙酸乙酯萃取物

5、和CO<,2>超臨界萃取物進一步的分離，共得到8個已知化合物。根據(jù)理化性質(zhì)、以及<'1>H-NMR、<'13>C-NMR和MS等波譜數(shù)據(jù)分析鑒定了8個化合物的結(jié)構(gòu)，它們分別是：熊果酸(Ⅰ)、齊墩果酸(Ⅱ)、2-羥基-熊果酸(Ⅲ)、薔薇酸(Ⅳ)、十六碳烯酸(Ⅴ)、十六烷酸(Ⅵ)、β-谷甾醇(Ⅶ)、馬斯里酸甲酯(Ⅷ)。(二)按《中藥注射劑指紋圖譜研究的技術(shù)要求(暫行)》，選用熊果酸作為主要的指標成分進行考查，采用HPLC色譜法對枇杷葉進行指

6、紋圖譜的研究，該方法能使枇杷葉中大部分化學成分得到較好的分離，具有良好的穩(wěn)定性、重現(xiàn)性。從藥材整體色譜圖著手，選取參照峰、特征峰，判斷峰的位置和峰與峰間的比例關(guān)系，構(gòu)成了枇杷葉特有的色譜指紋圖譜全貌，而且本方法快速簡單易行，為枇杷葉藥材的品質(zhì)評價、質(zhì)量標準制定提供依據(jù)。(三)通過查閱文獻得知枇杷葉中的有效成分主要集中在三萜酸類：熊果酸、齊墩果酸、2 α-羥基熊果酸、坡模酸、薔薇酸、馬斯里酸甲酯等，在分析了枇杷葉的一系列化合物的基礎(chǔ)上，枇