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文檔簡介
1、韭蛆取食范圍廣,可危害多種蔬菜,是韭菜生產(chǎn)的大敵。目前對于韭蛆的生物學特性研究較少,在不了解韭蛆的特性下,濫用化學農(nóng)藥防治韭蛆的現(xiàn)象普遍發(fā)生,造成環(huán)境污染,且韭菜中農(nóng)藥殘留率高,嚴重威脅人們的身體健康。本文以黑龍江省地區(qū)為背景,調(diào)查了該省的韭蛆種群分布,研究了韭蛆的發(fā)生情況;利用黑龍江省主栽的4科7種宿主植物飼養(yǎng)韭蛆,構(gòu)建7種飼養(yǎng)方式下韭蛆年齡-齡期兩性生命表,明確了韭蛆在7種宿主植物上的生物學特性指標;同時利用高通量測序技術研究了韭蛆
2、的耐寒性,篩選出了耐寒基因,研究了耐寒機制。
本研究主要內(nèi)容包括:⑴初步明確韭蛆在黑龍江省韭菜主產(chǎn)區(qū)田間種群動態(tài)規(guī)律,通過在寧安和呼蘭兩個地區(qū)定點觀測,利用黃板法調(diào)查了不同時期韭蛆成蟲田間發(fā)生情況,結(jié)果表明黑龍江省韭蛆最早發(fā)生在4月中旬,有5月初-5中旬,6月中旬以及9月中下旬2個高峰期,10月中旬后不發(fā)生。⑵探索不同宿主植物對韭蛆生長發(fā)育影響,闡明韭蛆在黑龍江省潛在危害宿主。利用黑龍江省主栽的4科7種宿主植物飼養(yǎng)韭蛆,構(gòu)建了
3、韭蛆年齡-齡期兩性生命表,研究結(jié)果表明韭蛆可以在7種宿主植物上完成繼代培養(yǎng),但各生育指標差異顯著,總的發(fā)育歷期方面韭菜、大蔥和黃瓜時間較短,分別為25.63d、27.87d和25.18d,韭菜飼養(yǎng)在單雌產(chǎn)卵量方面最高達到87粒、其次為黃瓜和大蔥,與其它宿主相比差異顯著,生存率也表現(xiàn)類似規(guī)律。在不同種群參數(shù)方面,韭蛆在韭菜上的內(nèi)稟增長率(rm)、凈生值率(R0)和周限增長率(λ)均為最大,除在黃瓜飼養(yǎng)上的λ外,均與其它宿主處理形成顯著性差
4、異??傮w適應性看韭菜為最適植物,其次為大蔥、黃瓜、大蒜、白菜、蘿卜,土豆適應性最弱。⑶摸清韭蛆耐寒蟲態(tài)與耐受極限溫度,通過對韭蛆4齡老熟幼蟲和蛹在不同溫度下的生存率和過冷卻點測定,結(jié)果表明從25℃到0℃過冷卻點逐漸降低,從0℃到-2℃呈逐漸上升趨勢,低溫馴化后蛹生存率高于4齡老熟幼蟲。⑷構(gòu)建韭蛆蛹0℃低溫馴化種群與室溫培養(yǎng)種群RNA轉(zhuǎn)錄組文庫,完成測序與分析,總計產(chǎn)出4.65億數(shù)據(jù)量,共組裝47102個unigenes,差異表達基因總共
5、10695個,注釋到GO分類中共有6486個,表明低溫處理對韭蛆RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生顯著影響。⑸完成韭蛆耐寒基因篩選與功能分析,初步解析韭蛆耐寒分子機制。通過功能注釋,成功篩選47個與耐寒性相關基因,共計9類,分別TCP-1、胞色素C氧化酶亞基、胰蛋白酶、絲氨酸蛋白酶胰蛋白酶樣蛋白、泛素、Hsp70、Hsp90、核糖體蛋白和肌動蛋白。胞色素C氧化酶亞基基因均上調(diào),該基因受酶機制調(diào)控進而參與新陳代謝,促進小分子物質(zhì)合成,可能參與多元冷凍保護系統(tǒng)
6、機制耐寒。同時該基因與其余基因可能共同參與多分子共同抵御傷害機制耐寒,胰蛋白酶和絲氨酸蛋白酶胰蛋白酶樣蛋白為食物利用基因,參與糖脂轉(zhuǎn)化和脂肪酸合成耐寒,泛素、TCP-1和Hsp70及Hsp90均參與到壓力反應中共同參與蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與小分子積累耐寒。肌動蛋白表現(xiàn)下調(diào),主要為骨架基因通過調(diào)節(jié)細胞膜流動性及休眠來抵御低溫,而核蛋白酶基因下調(diào)通過調(diào)控因子參與細胞生長或死亡。這些基因可能通過上調(diào)和下調(diào)綜合控制完成多分子共同抵御傷害機制耐寒。總之,韭
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