淫羊藿總黃酮對(duì)環(huán)磷酰胺致小鼠免疫低下及生精障礙拮抗作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:本課題旨在通過環(huán)磷酰胺建立免疫低下和生精障礙模型,探討淫羊藿總黃酮(TFE)的免疫調(diào)節(jié)作用及對(duì)生殖系統(tǒng)的保護(hù)作用。
　　方法:將 BalB/C小鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、淫羊藿總黃酮低、中、高劑量組?？瞻讓?duì)照組腹腔注射生理鹽水(NS),其余各組腹腔注射環(huán)磷酰胺建立相應(yīng)模型?？瞻讓?duì)照組和模型組灌胃1％CMC-Na,淫羊藿總黃酮低、中、高劑量組分別按照200mg/kg、400mg/kg、800mg/kg劑量灌胃淫羊藿總黃酮的

2、CMC-Na溶液,連續(xù)給藥35天。(1)通過測定各組小鼠脾臟重量、脾淋巴細(xì)胞絕對(duì)數(shù)量和相對(duì)數(shù)量、脾臟中總 T細(xì)胞、CD4+ T細(xì)胞、CD8+ T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞的絕對(duì)數(shù)量以及骨髓有核細(xì)胞數(shù)量研究淫羊藿總黃酮的免疫調(diào)節(jié)作用。(2)通過測定各組小鼠睪丸重量、附睪重量、附睪精子密度、精子活率、各級(jí)生精細(xì)胞百分比、睪丸組織形態(tài)學(xué)變化、睪丸組織中SOD、GPX的活力、MDA的含量評(píng)價(jià)淫羊藿總黃酮對(duì)生精障礙小鼠生殖系統(tǒng)的保護(hù)作用,并通過檢測睪

3、丸組織中SOD和GPX基因的表達(dá)以及生精小管內(nèi)生精細(xì)胞的凋亡和Bcl-2、Bax基因及蛋白的表達(dá)探討淫羊藿總黃酮對(duì)生精障礙小鼠生殖系統(tǒng)的保護(hù)作用機(jī)理。
　　結(jié)果:(1)造模結(jié)束后,模型組小鼠脾淋巴細(xì)胞絕對(duì)數(shù)量、相對(duì)數(shù)量、骨髓有核細(xì)胞數(shù)量及脾臟中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+(B細(xì)胞)、CD3-CD49b+(NK細(xì)胞)細(xì)胞的絕對(duì)數(shù)量低于空白對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.01或 P﹤0.05)。淫羊藿總黃酮低劑量組小鼠脾

4、淋巴細(xì)胞、骨髓有核細(xì)胞及脾臟中CD3+、CD8+、NK細(xì)胞絕對(duì)數(shù)量高于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.01或 P﹤0.05)。淫羊藿總黃酮中劑量組小鼠脾臟中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、NK細(xì)胞及骨髓有核細(xì)胞絕對(duì)數(shù)量高于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.01或 P﹤0.05)。淫羊藿總黃酮高劑量組小鼠脾淋巴細(xì)胞絕對(duì)數(shù)量、相對(duì)數(shù)量、骨髓有核細(xì)胞及脾臟中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、NK細(xì)胞的絕對(duì)數(shù)量高于模型組,差

5、異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.01或 P﹤0.05)。(2)造模結(jié)束后,模型組小鼠睪丸重量、附睪重量、精子密度、精子活率顯著低于空白對(duì)照組,睪丸組織中各級(jí)生精細(xì)胞比例失調(diào),形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)發(fā)生紊亂,生精小管內(nèi)多見凋亡細(xì)胞, SOD、GPX的活力顯著降低,MDA含量升高,睪丸組織中SOD2、SOD3、GPX1、Bcl-2 mRNA表達(dá)顯著下調(diào),Bax mRNA表達(dá)顯著上調(diào),Bcl-2/Bax蛋白表達(dá)比值下降,與空白組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.01

6、或 P﹤0.05)。淫羊藿總黃酮顯著增加模型小鼠睪丸重量、附睪重量、精子密度和活率及睪丸內(nèi)4N生精細(xì)胞的百分比,改善模型小鼠睪丸組織病理損傷,提高小鼠睪丸組織中SOD、GPX的活性、降低 MDA含量,上調(diào) SOD3、GPX1、Bcl-2基因的表達(dá),下調(diào) Bax基因的表達(dá),上升 Bcl-2/Bax蛋白表達(dá)的比例,與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.01或 P﹤0.05)。
　　結(jié)論:(1)淫羊藿總黃酮可顯著調(diào)節(jié)環(huán)磷酰胺所致免疫低下

7、小鼠的免疫功能,其免疫調(diào)節(jié)的部分機(jī)制在于增加脾淋巴細(xì)胞絕對(duì)數(shù)量和相對(duì)數(shù)量,調(diào)節(jié)脾臟中T淋巴細(xì)胞亞群、B淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞數(shù)量,并與促進(jìn)骨髓有核細(xì)胞的增殖有關(guān)。(2)淫羊藿總黃酮可顯著恢復(fù)環(huán)磷酰胺所致生精障礙小鼠的生殖功能,能夠增加睪丸重量、附睪重量、精子密度、精子活率以及睪丸內(nèi)4N生精細(xì)胞的百分比;清除睪丸組織中的氧自由基,提高睪丸組織中SOD、GPX的活性、降低 MDA含量;上調(diào) SOD3、GPX1、Bcl-2基因的表達(dá),降低 Bax