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文檔簡介
1、射干常規(guī)繁殖因分割根莖費(fèi)時(shí)費(fèi)力,用種量大,且長期進(jìn)行無性繁殖,易導(dǎo)致種質(zhì)退化,影響產(chǎn)量及品質(zhì),無法滿足目前市場的大量需求和品質(zhì)要求。因此,本試驗(yàn)對(duì)射干進(jìn)行組織培養(yǎng)快速繁殖研究,建立射干快速繁殖體系,為今后的工廠化育苗提供理論依據(jù)。 試驗(yàn)以射干葉片、根莖和腋芽為材料,進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)、愈傷組織分化、不定芽誘導(dǎo)、不定芽增殖、試管根莖誘導(dǎo)及發(fā)芽、試管苗生根及移栽等試驗(yàn)研究;并對(duì)后代植株移栽大田后的農(nóng)藝性狀、生理生化及細(xì)胞顯微結(jié)構(gòu)進(jìn)行分
2、析,初步建立了射干快速繁殖體系。 試驗(yàn)結(jié)果如下: 1、以葉片為材料,進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)、繼代及分化:得出射干愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基是MS+2,4-D 2mg.L-1+AgNO3 10.0mg.L-1+糖3%+瓊脂5%,愈傷組織誘導(dǎo)率最高為95.83%。射干愈傷組織繼代的最佳培養(yǎng)基是MS+2,4-D1mg.L-1+AgNO3 10.0mg.L-1+糖3%+瓊脂5%,愈傷組織平均鮮重增殖最高3.42g。射干愈傷組織分化的最佳
3、培養(yǎng)基是:MS+BA1.0mg.L-1+糖3%+瓊脂5%,愈傷組織分化率是隨代數(shù)增加而降低,分化的最佳代數(shù)為第二代,分化率達(dá)最高86.7%,分化苗長勢良好。 2、不定芽的增殖:以根莖和腋芽為材料,誘導(dǎo)不定芽形成,得出不定芽增殖的最佳培養(yǎng)基是MS+BA 2.0mg.L-1+NAA0.5mg.L-1+糖6%+瓊脂5%,叢生芽數(shù)最多為207個(gè),增殖率高達(dá)690.00%。 3、試管苗生根和移栽:將小苗分單株接入生根培養(yǎng)基生根,得出試管苗
4、生根的最佳培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 1.0mg·K-1+糖3%+瓊脂5%,平均生根數(shù)最多4.3條。將生根試管苗在室外煉苗一周,移栽至盛有腐質(zhì)土+沙子的營養(yǎng)杯中,20d后移栽到大田,繼6代試管苗成活率最高,成活率為80%。 4.試管根莖的誘導(dǎo)、發(fā)芽:射干試管根莖誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基是MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1+白糖6%,培養(yǎng)基中不宜添加活性炭。試管根莖接入培養(yǎng)基MS+BA 2.0mg·L-1+白
5、糖3%上,發(fā)芽率達(dá)61.03%。試管根莖移栽于大田中,發(fā)芽率達(dá)50%。 5、農(nóng)藝性狀調(diào)查:試管根莖后代植株與大田根莖后代植株的株高和葉片數(shù)無差異,長勢都較好,但分蘗數(shù)比大田根莖植株平均多1.2株,葉綠素含量比試管根莖后代植株的葉綠素含量高出0.017;繼代第6代后代植株的長勢略好于CK后代植株的長勢,葉綠素含量比CK的葉綠素高0.093,分蘗數(shù)比CK略有提高。 6、后代植株變異研究:射干CK過氧化物同工酶酶譜的遷移率分別
6、為Rf1=0.11、Rf2=0.20,不定芽增殖繼代到第六代,其后代植株未發(fā)生變異,愈傷組織繼代到第4代后代植株與CK相比少了Rf1=0.11的酶譜帶,其植株發(fā)生變異;對(duì)后代植株葉片的顯微結(jié)構(gòu)觀察,發(fā)現(xiàn)不定芽繼代到第六代植株未發(fā)生變異,愈傷組織繼代到第4代植株氣孔器數(shù)目比CK增多,細(xì)胞內(nèi)外壁有增厚現(xiàn)象。試驗(yàn)表明通過愈傷組織產(chǎn)生的不定芽,其后代植株易發(fā)生變異。 綜上所述:經(jīng)叢生芽增殖的途徑和試管根莖繁殖獲得的后代植株的農(nóng)藝性狀較好
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