基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜掃描生物組織切片成像方法的建立及應(yīng)用.pdf

1、建立了基質(zhì)輔助激光解吸附電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)直接掃描生物組織切片獲得切片中組分分布圖的方法?？疾炝诵迈r組織貯存，冰凍切片的方法；探討了基質(zhì)種類、濃度、覆蓋方法，研發(fā)了基質(zhì)噴霧專用裝置和方法，優(yōu)化了質(zhì)譜信號(hào)全自動(dòng)掃描參數(shù)：15mg/mL SA逐步噴霧法、15μm切片厚度、200μm點(diǎn)陣間距、30％～50％激光能量和200次信號(hào)累加；優(yōu)化了原始信號(hào)全自動(dòng)處理參數(shù)和質(zhì)譜峰統(tǒng)計(jì)參數(shù)。自編軟件補(bǔ)充了商用軟件所缺少的“組織切

2、片質(zhì)譜平均譜以及譜峰命中次數(shù)Hits值分布統(tǒng)計(jì)”兩個(gè)重要功能。結(jié)果表明，Hits值越大，組分分布越廣。通過對(duì)照品的質(zhì)譜成像分析，證實(shí)了本方法的組分分布圖像的定位是準(zhǔn)確的。本文共獲得250余張切片的4萬多張質(zhì)譜圖。該方法穩(wěn)定可行，重復(fù)性優(yōu)于80％。 分析了SD大鼠的肺水腫組織(16例)和正常肺組織(15例)，采用t-檢驗(yàn)(P<0.05)篩選出12個(gè)差異分子，其中，3個(gè)上調(diào)，9個(gè)下調(diào)，而且上調(diào)、下調(diào)的分子與其分子量密切相關(guān)，這在其他

3、組織的相關(guān)研究中未觀察到，可能是肺水腫疾病特有的。根據(jù)這12個(gè)差異分子建立分類預(yù)測(cè)模型，對(duì)11個(gè)混合樣例進(jìn)行盲篩，準(zhǔn)確率達(dá)到91％(10/11)。 還分析了人胃腸間質(zhì)瘤組織(12例)和正常組織(12例)，采用t-檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，篩選出16個(gè)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異分子(P<0.05)，其中，9個(gè)上調(diào)，7個(gè)下調(diào)。根據(jù)這16個(gè)差異分子建立分類預(yù)測(cè)模型，對(duì)8個(gè)混合樣例進(jìn)行盲篩，準(zhǔn)確率達(dá)到100％。 另外，本文還統(tǒng)計(jì)了肝臟、肺水腫組