山東省無(wú)花果種質(zhì)資源遺傳多樣性評(píng)價(jià)及品種鑒定研究.pdf

1、山東省作為我國(guó)無(wú)花果（Ficus carica L）早期主要傳入地和栽培地區(qū)之一，已有一百多年的栽培歷史。特別是山東半島一帶，被稱為我國(guó)無(wú)花果的沿海栽培中心。無(wú)花果雖然以無(wú)性繁殖為主，但是不同環(huán)境條件下的繁衍盈升，也會(huì)造成種內(nèi)變異的多樣性。而且，在很多地區(qū)都是庭院栽培，一些特殊的基因資源極有可能還未得到認(rèn)識(shí)和利用。所以，很有必要對(duì)分布地區(qū)的無(wú)花果資源進(jìn)行勘察和搜集保存，展開(kāi)其多樣性研究，尤其是對(duì)種質(zhì)間的遺傳差異從分子水平提供更為直接的證

2、據(jù)，為進(jìn)一步有效的開(kāi)發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。
　　 本研究利用RAPD（Random Amplification Polymorphism DNA）標(biāo)記技術(shù)，對(duì)從山東省境內(nèi)不同地區(qū)搜集到的無(wú)花果資源的多樣性進(jìn)行了評(píng)估。并對(duì)與葉形相關(guān)的分子標(biāo)記進(jìn)行了研究。另外，利用RAPD和SSR(Simple Sequence Repeat)兩種分子標(biāo)記技術(shù)構(gòu)建部分無(wú)花果品種的DNA指紋圖譜。
　　 獲得如下研究結(jié)果:
　　 1.通過(guò)對(duì)

3、8個(gè)市近20個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)（社區(qū)）的考察搜集，共搜集無(wú)花果資源66份，現(xiàn)田間保存資源31份共55株。
　　 2.通過(guò)15個(gè)隨機(jī)引物在58份資源上的RAPD分析，將所搜集的資源分為23個(gè)不同的基因型。隨后又從120個(gè)隨機(jī)引物中篩選出28個(gè)多態(tài)性高的引物，進(jìn)一步對(duì)這23個(gè)基因型無(wú)花果進(jìn)行RAPD多樣性分析。共檢測(cè)到309個(gè)清晰的位點(diǎn)，擴(kuò)增片段范圍在200bp～2500bp之間。其中多態(tài)性位點(diǎn)為236個(gè)，共有位點(diǎn)為73個(gè)，位點(diǎn)多態(tài)性比率為76

4、.4％。利用NTSYS-pc分析軟件分析了這23個(gè)基因型間的遺傳相似系數(shù)。計(jì)算結(jié)果表明，絕大多數(shù)基因型之間遺傳相似性較高，但其中之一與其它基因型資源的相似系數(shù)較低，可見(jiàn)其遺傳背景比較特殊。利用UPGMA法構(gòu)建了聚類(lèi)樹(shù)狀圖，當(dāng)閾值為0.760時(shí)，可將23個(gè)基因型聚為五類(lèi)。
　　 3.在對(duì)無(wú)花果的多樣性進(jìn)行分析的過(guò)程中，鑒定出兩個(gè)與基部非心形/心形葉形相連鎖的標(biāo)記:S20821640、S21041614。這兩個(gè)標(biāo)記經(jīng)SCAR轉(zhuǎn)化后，

5、前者的多態(tài)性依然存在，可作為資源鑒定的有效手段。而后者在不同葉形間的多態(tài)性消失，對(duì)于這一問(wèn)題，我們還會(huì)做進(jìn)一步的研究。
　　 4.利用RAPD和SSR兩種分子標(biāo)記技術(shù)，對(duì)收集到的11個(gè)無(wú)花果品種的DNA指紋進(jìn)行了分析。經(jīng)過(guò)28個(gè)隨機(jī)引物的分析，最終區(qū)分出其中的三個(gè)品種，并將剩下的8個(gè)品種分為三組。其中，引物S1259的區(qū)分效率最高。通過(guò)8對(duì)SSR引物的擴(kuò)增分析，多態(tài)性較高的引物MFC1和MFC4均能鑒定出其中的兩個(gè)品種。將這兩對(duì)