田間成年“碧秀”苦瓜優(yōu)株離體快繁體系研究.pdf

1、苦瓜(MomordicacharantiaL.)為葫蘆科苦瓜屬1年生攀援草本植物，具有藥食兩用等特點，栽培面積和消費量很大，是世界各國普遍栽培的重要蔬菜作物之一。離體培養(yǎng)是苦瓜進行無性繁殖和種質(zhì)資源保存的有效途徑，也是進行基因轉(zhuǎn)化研究的基礎。本文以田間選擇得到的成年“碧秀”苦瓜優(yōu)株枝條的莖段和頂芽為材料，對影響苦瓜離體培養(yǎng)的諸因素進行了系統(tǒng)的研究，成功建立了苦瓜離體莖段直接不定芽途徑再生體系，獲得再生植株。主要結(jié)果如下： (1)

2、0.1％升汞(HgCl2)處理6-8min為苦瓜外植體最佳消毒時間；外植體的最佳取材時間為6～7月，其次為5月；取材部位選擇苦瓜枝條的第3～5節(jié)莖段，1.0cm長度帶一個節(jié)間，即我們定義的中部枝條。 (2)適當高濃度的6-BA有利于苦瓜不定芽萌動，但同濃度KT不適于不定芽萌動。篩選出直接不定芽誘導最佳培養(yǎng)基為：MS+BA4.0mg/L+IBA0.1mg/L，直接不定芽誘導率達41.46％。 (3)附加絲瓜傷流液，可以顯著

3、提高芽體的啟動時間及萌發(fā)率，濃度為10％(v/v)時，萌動率達61.21％，萌動時間僅為6d。 (4)繼代增殖試驗中通過增殖倍數(shù)、平均株高分析表明苦瓜莖段的最佳增殖培養(yǎng)基為：MS+BA1.0mg/L+KT1.0mg/L+IBA0.1mg/L。 (5)添加硝酸銀(AgNO3)后，增殖系數(shù)大大增加，植株株高卻受到抑制，AgNO3濃度為1.0mg/l,增殖系數(shù)可達6.09。 (6)不定芽增殖系數(shù)隨著活性炭(AC)的加入

4、而顯著下降，但AC對于不定芽的伸長具有明顯的促進作用。 (7)絲瓜傷流液在提高增殖系數(shù)的同時也增加愈傷組織的發(fā)生量。不同碳源、水源對增殖影響不大，一定條件下，可以考慮自來水替代蒸餾水。 (8)結(jié)合生根率、平均根數(shù)及平均根長，誘導苦瓜不定芽的最佳生根培養(yǎng)基為：1/2MS+IBA0.2或0.3mg/L+20g/L蔗糖。 (9)添加AgNO3、AC并不能促進組培苗不定根的誘導。 (10)以濾紙和絲瓜瓤作為支持體