三種中藥活性成分的提取、分離、純化和含量測定.pdf

1、本論文研究了茜草中RMC和OA的提取分離、結(jié)構(gòu)鑒定和含量測定等內(nèi)容，并確立了連翹中蘆丁和卷柏中穗花衫雙黃酮的含量測定方法。 對RMC的研究：首先以提取溶劑、料液比、提取時間、提取次數(shù)4個因素，每因素設(shè)3個水平，RMC提取率(％)為評價指標進行L<,9>(3<'4>)正交實驗，確定了RMC最佳提取工藝為20倍量石油醚提取2次，每次2個小時，提取率為0.8％；然后依次用常壓硅膠柱、凝膠柱和減壓硅膠柱色譜分離手段等進行分離，用重結(jié)晶法

2、進行純化；得到的化合物用MS、<'1>H NMR和<'13>C NMR等波譜學(xué)方法進行結(jié)構(gòu)鑒定；用反相高效液相色譜法(RP-HPLC)測定了欒川、四川、湖北、廣西、貴州、河南(百氏康)和陜西7個產(chǎn)地的中藥材中RMC含量。色譜柱為Purospher star(250 mm×4.6 mm，5 μm，Merk公司)，流動相為甲醇-水-四氫呋喃(90：9.3：0.7)，檢測波長為250 nm，流速為1.0 mL/min，柱溫為25℃。結(jié)果RMC

3、進樣量與峰面積在0.20～2.0μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=1)。除陜西藥材分離效果不好外，其它6產(chǎn)地茜草中RMC含量(％)為欒川(1.2％)>四川(0.77％)>湖北(0.75％)>廣西(0.60％)>貴州(0.37％)>河南(百氏康)(0.32％)。 對QA的研究：茜草藥材用丙酮-水(7：3)冷浸提取，得到的浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取得到的正丁醇部分依次用常壓硅膠柱、加壓硅膠柱、凝膠柱、減壓硅膠柱等色譜分離

4、手段進行分離，最后用重結(jié)晶法進行純化；采用MS、<'1>H NMR、<'13>C NMR等波譜學(xué)方法進行結(jié)構(gòu)鑒定；使用RP-HPLC法測定欒川、陜西、廣西、四川、貴州、湖北6產(chǎn)地藥材中QA含量，流動相為甲醇-水-四氫呋喃(65：34.7：0.3)，流速為1.0 mL/min，檢測波長為276 nm，柱溫為25℃，外標法定量分析。結(jié)果表明進樣量與峰面積在0.020 μg～0.16 μg之間時，線性關(guān)系良好(r=0.9998)。陜西和欒川樣

5、中QA含量分別為0.053％和0.42％，其它產(chǎn)地藥材可能因其成分復(fù)雜而導(dǎo)致分離效果不佳。 連翹中蘆丁的含量測定：用RP-HPLC法測定連翹果實、7月葉、7月莖、老葉中蘆丁的含量，流動相為甲醇-2％冰乙酸水溶液(42：58)，流速為0.80 mL/min，檢測波長為359 nm，柱溫為25℃。該方法的線性范圍為0.68～6.8μg，r=1，平均回收率為98％，RSD為2.0％(n=6)。結(jié)果測得，連翹果實、7月葉、7月莖和老葉所

6、含蘆丁的量為：7月葉(0.92％)>老葉(0.35％)>果實(0.28％)>7月莖(0.12％)。卷柏中穗花衫雙黃酮的含量測定：用RP-HPLC測定墊狀卷柏和卷柏藥材中的穗花杉雙黃酮的含量，流動相為甲醇-0.1％磷酸水溶液(65：35)，流速為0.8 mL/min，檢測波長為337 nm，柱溫為25℃。該方法的線性范圍為0.038～0.34μg，r=0.9999。實驗測得貴州和湖南卷柏中穗花杉雙黃酮含量分別為0.19％和0.51％，西藏