自擬中藥復(fù)方對(duì)小鼠大腸桿菌感染的預(yù)防作用研究.pdf

1、目的:為探討自擬中藥復(fù)方對(duì)動(dòng)物機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)及預(yù)防感染疾病的作用機(jī)理，試驗(yàn)研究了預(yù)防用自擬中藥復(fù)方對(duì)感染大腸桿菌小鼠血液生理指標(biāo)、免疫器官病理變化及其指數(shù)、血清中Th17及Treg型細(xì)胞因子以及TLR4信號(hào)通路關(guān)鍵信號(hào)分子的影響。
　　方法:(1)選取6只健康小鼠為對(duì)照組（記為-72h），另選取252只精神、體況接近的小鼠，按照性別、體重分為6組。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組為中藥復(fù)方組，灌胃劑量（相當(dāng)于生藥含量，按0.1 mL/10g灌胃）分別

2、為:20g/kg、10g/kg、5g/kg;Ⅳ組為藥物對(duì)照組，按66mg/kg灌胃黃芪多糖，Ⅴ組為模型組及Ⅵ組為健康對(duì)照組灌胃同體積蒸餾水，均1次/d，連用3d。試驗(yàn)第4d，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組小鼠均腹腔注射1.7×108CFU/mL大腸桿菌液（0.1 mL/只），Ⅵ組小鼠注射等量生理鹽水。(2)在感染0h、3h、6h、12h、24h、48h、1w，每組分別選取6只小鼠處死獲取全血及血清樣本，采集小鼠-72h、0h、12h、1w的胸腺、

3、脾臟備用。(3)用全自動(dòng)動(dòng)物血液細(xì)胞分析儀檢測(cè)小鼠血液生理指標(biāo);用ELISA方法測(cè)量血清中IL-6、IL-10、IL-17、IL-23、TGF-β、TLR4、MyD88、TRIF、NF-κB、P38、JNK、ERK、IRF3、TNF-α、IFN-β的含量。(4)稱取小鼠-72h、0h、1w的胸腺、脾臟及體質(zhì)量，計(jì)算臟器指數(shù)，制作-72h、0h、12h、1w的胸腺、脾臟病理切片。
　　結(jié)果:(1)用藥3日后，各中藥復(fù)方組小鼠的WBC

4、、LYM及LYM％均顯著高于模型組及對(duì)照組(P＜0.05）;感染3h～24h，中藥復(fù)方組小鼠的WBC、LYM、MID，在3h～12h的RBC、HGB均顯著高于模型組（P＜0.05）。(2)用藥3日后，中藥復(fù)方組小鼠血清IL-17、IL-23，高劑量組的IL-10，中、低劑量組的IL-17/IL-10均顯著高于模型組及對(duì)照組（P＜0.05）;在感染3h復(fù)方中藥組的IL-10均顯著低于感染組(P＜0.05)，IL-17/IL-10比值均極顯

5、著高于感染組(P＜0.01)，高、中劑量組的IL-17均高于感染組（P＞0.05），IL-23、TGF-β均低于模型組（P＞0.05）。(3)用藥3日后，小鼠血清JNK、NF-κB及TNF-α顯著高于模型組及空白對(duì)照組(P＜0.05)，P38及IL-6顯著低于模型組及空白對(duì)照組(P＜0.05)，高劑量組TRIF、IFN-β極顯著高于模型組及空白對(duì)照組(P＜0.01);與模型組相比，中藥復(fù)方組血清TLR4在感染期間均顯著降低(P＜0.05

6、)，MyD88在6h后顯著降低（P＜0.05），NF-κB在6h～12h極顯著降低(P＜0.01)，P38、JNK在感染期間均顯著降低（P＜0.05），高劑量、低劑量組ERK在感染期間均顯著降低（P＜0.05），細(xì)胞因子TNF-α、IL-6在3h極顯著降低(P＜0.01)，IFN-β無(wú)明顯變化（P＞0.05）。(4)用藥3日后，中藥復(fù)方中劑量、低劑量組小鼠的脾質(zhì)量、胸腺質(zhì)量及其指數(shù)均顯著高于模型組及對(duì)照組(P＜0.05)，在1w時(shí)，中藥

7、復(fù)方組體質(zhì)量、脾質(zhì)量、胸腺質(zhì)量及其系數(shù)均顯著高于感染組(P＜0.05)，脾臟病理組織形態(tài)受損程度較小。
　　結(jié)論:(1)通過(guò)向小鼠腹腔注射1.7×108CFU/mL大腸桿菌液(0.1 mL/只)，可成功復(fù)制小鼠感染模型。(2)預(yù)防用自擬中藥復(fù)方能明顯改善小鼠血液生理指標(biāo)并提高感染大腸桿菌小鼠的外周血的RBC、HGB、WBC、LYM及MID，從而提高小鼠對(duì)大腸桿菌的抗感染能力。(3)預(yù)防用自擬中藥復(fù)方通過(guò)影響感染小鼠血清IL-17、