特異降解性海藻酸鹽水凝膠微載體.pdf

1、本論文從分子水平設(shè)計(jì)出細(xì)胞相容性良好的新型天然聚合物水凝膠人工細(xì)胞外基質(zhì)材料，并構(gòu)建出相應(yīng)的可用于干細(xì)胞擴(kuò)增的大孔微載體。在水溶性碳二亞胺的活化作用下，海藻酸鈉的羧基與交聯(lián)劑胱胺中的氨基發(fā)生酰胺化交聯(lián)反應(yīng)而形成水凝膠，由胱胺引入的二硫鍵交聯(lián)結(jié)構(gòu)可以在半胱氨酸等還原劑的作用下斷裂形成巰基，此類水凝膠微載體具備特異的體外降解性能。即，在溫和的生理?xiàng)l件下可通過非酶解途徑降解載體材料而回收擴(kuò)增后的細(xì)胞。
　　 分子鏈過于親水不能有效吸附

2、蛋白成分、缺乏細(xì)胞結(jié)合位點(diǎn)、不能和細(xì)胞發(fā)生特異相互作用是海藻酸鹽水凝膠作為細(xì)胞載體材料應(yīng)用時(shí)的主要問題。為了克服這一缺陷，本論文采用LbL技術(shù)利用聚電解質(zhì)間的靜電相互作用，將殼聚糖和肝素等天然生物材料固定于海藻酸鹽水凝膠膜表面，從而對其進(jìn)行適宜的表面改性和修飾，以增加水凝膠膜的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和細(xì)胞黏附性。進(jìn)一步利用纖連蛋白(FN)與殼聚糖的靜電相互作用以及堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)與肝素的特異性親和作用，將生長因子、纖連蛋白等生物活

3、性物質(zhì)吸附到海藻酸鹽水凝膠膜表面，從而達(dá)到促進(jìn)細(xì)胞黏附與增殖的目的。L929細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)多重表面修飾后的海藻酸鹽水凝膠膜具有較好的細(xì)胞相容性，表面固定FN與bFGF后能夠更好地促進(jìn)細(xì)胞的黏附與增殖。細(xì)胞毒性結(jié)果顯示，以半胱氨酸作為還原劑降解水凝膠材料后的溶出/降解物基本沒有表現(xiàn)出細(xì)胞毒性。
　　 采用W/O懸浮交聯(lián)法制備出海藻酸鹽水凝膠微球，粒徑統(tǒng)計(jì)結(jié)果證實(shí)海藻酸鈉溶液的濃度越高微球的平均粒徑越大，分散劑用量增多可使微球