依那普利拉注射液對(duì)燒傷早期心肌損害的防治作用研究.pdf

1、背景與目的： 嚴(yán)重?zé)齻?，由于心肌自身的RAS系統(tǒng)迅即激活導(dǎo)致早期心肌缺血缺氧等因素，使得因?yàn)槊?xì)血管通透性增加導(dǎo)致血容量顯著下降之前，心肌即發(fā)生了缺血缺氧損害和心功能減退。這種即早出現(xiàn)的心肌損害及心臟泵血功能減弱，是嚴(yán)重?zé)齻菘撕腿毖毖醯闹匾獑?dòng)因素之一。本課題旨在觀察血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑-依那普利拉注射液對(duì)燒傷早期心肌缺血缺氧損害的防治作用，為燒傷早期臨床應(yīng)用血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑防治燒傷后心肌損害提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

2、 材料與方法： 1、依那普利拉注射液對(duì)燒傷后大鼠臟器損害保護(hù)作用的量效關(guān)系研究 健康SpragueDawley(SD)大鼠54只(第三軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，體重(250±20)g，雌雄不拘，隨機(jī)分為3組：正常對(duì)照組(N組，n=6)，不做處理進(jìn)行觀察；燙傷對(duì)照組(B組，，n=12，分別為傷后6h和12h)，按本所常規(guī)方法制備30％TBSAIII度燙傷(病理切片證實(shí))，燙傷后按Parkland公式(4ml·Kg-

3、1·1％TBSA-1·24h-1)腹腔注射乳酸鈉林格氏液進(jìn)行液體復(fù)蘇；依那普利拉注射液治療組(E3組，E2組，E1組，n=36，分別為傷后6h和12h)，模型制備同B組，于燙傷后即刻分別給予(4mg·Kg-1，2mg·Kg-1，1mg·Kg-1)依那普利拉注射液腹腔注射。RM6240系列生理信號(hào)采集儀檢測(cè)主動(dòng)脈收縮壓(AOSP)、主動(dòng)脈舒張壓(AODP)、主動(dòng)脈平均壓(MAP)等指標(biāo)；頸總動(dòng)脈取血、分裝離心(2000rad/s、15mi

4、n)后，檢測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、激酸激酶(CK)、血尿素(BUN)、血肌酐(Cr)和血管緊張素II(AngII)含量；處死動(dòng)物后留取大鼠心臟、腎臟、肝臟、肺臟、腸道標(biāo)本，4％甲醛溶液固定，：HE染色、病理切片觀察臟器形態(tài)學(xué)變化；收集數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 2、依那普利拉注射液對(duì)嚴(yán)重?zé)齻笫笤缙谛募p害保護(hù)作用研究 健康SD大鼠90只，體重(250±20)g，雌雄不拘。隨機(jī)分為：正常對(duì)照組(N組，n=

5、6)、燙傷對(duì)照組(B組，n=30，分別為傷后1、3、6、12、24h等5個(gè)時(shí)相點(diǎn))和依那普利拉注射液小劑量治療組(E1組，n=30，分別為傷后1、3、6、12、24h等5個(gè)時(shí)相點(diǎn))，依那普利拉注射液中劑量治療組(E2組，n=12，分別為傷后6、12h等2個(gè)時(shí)相點(diǎn))和依那普利拉注射液大劑量治療組(E3組，n=12，分別為傷后6、12h等2個(gè)時(shí)相點(diǎn))，每個(gè)時(shí)相點(diǎn)6只動(dòng)物。按本所常規(guī)方法制備30％TBSAIII度燙傷(病理切片證實(shí))，燙傷后按

6、Parkland公式(4ml·Kg-1·1％TBSA-1·24h-1)腹腔注射乳酸鈉林格氏液進(jìn)行液體復(fù)蘇；依那普利拉注射液治療組模型制備同B組，于燙傷后即刻分別給予(4mg·Kg-1，2mg·Kg-1，1mg·Kg-1)依那普利拉注射液腹腔注射。于相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)采取頸總動(dòng)脈血標(biāo)本，分裝離心(2000rad/s、15min)后，檢測(cè)cTnI、CK-MB指標(biāo)，同時(shí)于不同時(shí)相點(diǎn)處死動(dòng)物，留取大鼠心臟組織標(biāo)本，一部分4％甲醛溶液固定，HE染色、病理

7、切片觀察臟器形態(tài)學(xué)變化；另取心尖部心肌組織約200mg，制作勻漿液檢測(cè)心肌組織勻漿液中的血管緊張素II(AngII)含量。收集數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 3、依那普利拉注射液對(duì)燒傷大鼠早期心肌力學(xué)影響的實(shí)驗(yàn)研究 健康SD大鼠90，口、，體重(250±20)g，雌雄不拘。隨機(jī)分為：正常對(duì)照組(N組，，n=6)、燙傷對(duì)照組(B組，n=30，分別為傷后1、3、6、12、24h等5個(gè)時(shí)相點(diǎn))和依那普利拉注射液小劑量治療組(E1組，n=

8、30，分別為傷后1、3、6、12、24h等5個(gè)時(shí)相點(diǎn))，依那普利拉注射液中劑量治療組(E2組，n=12，分別為傷后6、12h等2個(gè)時(shí)相點(diǎn))和依那普利拉注射液大劑量治療組(E3組，n=12，分別為傷后6、12h等2個(gè)時(shí)相點(diǎn))，每個(gè)時(shí)相點(diǎn)6只動(dòng)物。按本所常規(guī)方法制備30％TBSAIII度燙傷(病理切片證實(shí))，燙傷后按Parkland公式(4ml·Kg-1·1％TBSA-1·24h-1)腹腔注射乳酸鈉林格氏液進(jìn)行液體復(fù)蘇；依那普利拉注射液治療

9、組模型制備同B組，于燙傷后即刻分別給予(4mg·Kg-1，2mg·Kg-1，1mg·Kg-1)依那普利拉注射液腹腔注射。于相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)用RM6240系列生理信號(hào)采集儀檢測(cè)左心室收縮峰壓(LVSP)、左心室舒張末壓(LVEDP)和左心室內(nèi)壓上升/下降的最大速率(±dp/dtmax)等指標(biāo)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1.依那普利拉注射液對(duì)燒傷后大鼠臟器損害保護(hù)作用的量效關(guān)系 燙傷后6h和12h，燙傷組大鼠血清CK、BUN、Cr、A

10、ST、ALT、AngII等均明顯高于正常值(P＜0.01-0.05)，AOSP、AODP、MAP均明顯降低(P＜0.01)，臟器病理形態(tài)學(xué)變化明顯；小劑量依那普利拉注射液組血清CK、BUN、cr、AST、ALT、AngII等均明顯低于燙傷組和中大劑量組(P＜0.01-0.05)。AOSP、AODP、MAP雖低于正常(P＜0.01)，但均略高于燙傷組和中大劑量組(P＞0.05)。依那普利拉治療后，臟器病理形態(tài)學(xué)變化顯著減輕，以小劑量最為明

11、顯。 2、依那普利拉注射液對(duì)嚴(yán)重?zé)齻笫笤缙谛募p害的保護(hù)作用 燙傷組(B組)1、3、6、12、24h，大鼠血清心肌鈣蛋白I、CK-MB均顯著高于正常值(P＜0.01)，心肌組織可見顯著病理改變；依那普利拉注射液治療各組各時(shí)相點(diǎn)cTnI、CK-MB均顯著低于B組(P＜0.01-0.05)，心肌組織病變顯著減輕。 燙傷對(duì)照組心肌組織血管緊張素II含量顯著高于正常對(duì)照水平(P＜0.01)。應(yīng)用依那普利拉注射液治療后，

12、心肌組織勻漿液中血管緊張素II含量雖高于正常水平(P＜0.05)，但均顯著低于燙傷對(duì)照組，心肌組織血管緊張素II含量與依那普利拉注射液劑量呈負(fù)相關(guān)。 3.依那普利拉注射液對(duì)嚴(yán)重?zé)齻笫笤缙谛募×W(xué)的影響 大鼠燙傷后3h開始，LVSP、LVEDP、LV±dp/dtmax等均明顯下降，而應(yīng)用依那普利拉注射液治療后，LVSP、LVEDP、LV±dp/dtmax等均較對(duì)照組明顯升高(P＜0.01)，6h和12h，大、中、小劑量的

13、依那普利拉注射液均可使大鼠燙傷后的心肌力學(xué)LVSP、LVEDP、LV±dp/dtmax等指標(biāo)明顯改善(P＜0.01-0.05)，但以小劑量效果最為明顯。 討論與結(jié)論： 1、小劑量(1mg·Kg-1)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑依那普利拉注射液即能顯著降低血中AngII水平，減輕燒傷早期臟器缺血缺氧損害，對(duì)燒傷早期血壓影響較?。欢?、中劑量依那普利拉注射液可使血中AngII水平大幅度降低，有較明顯的降壓作用，有可能加重早期臟器缺

14、血缺氧損害。 2、心肌組織血管緊張素II含量與依那普利拉注射液劑量呈負(fù)相關(guān)，小劑量(1mg·Kg-1)依那普利拉注射液通過減少血管緊張素II的產(chǎn)生，改善心肌血液供養(yǎng)，清除氧自由基，改善心肌細(xì)胞能量代謝等多種途徑，可改善心肌供血，使cTnI、CK-MB等心肌損傷指標(biāo)含量降低，心肌組織病理形態(tài)變化減輕，對(duì)燒傷早期大鼠心肌損害具有較好的保護(hù)作用。 3、小劑量(1mg·Kg-1)依那普利拉注射液通過改善心肌供血和減輕心肌損害，能