茯苓高產優(yōu)質菌株的復壯技術研究.pdf

1、茯苓Wolfiporiacocos(Schw.)Ryv.＆Gilbn.是一種高等擔子菌，隸屬于層菌綱Hymcnomycetes，非褶菌目Aphyllophoralcs，多孔菌科Polyporaceae茯苓屬Wolfiporia，多年生的腐生真菌。其地下生長的菌核(sclerotium)是一種傳統(tǒng)的名貴藥食用真菌，具有較好的營養(yǎng)價值和藥用價值。茯苓野生資源極為有限，難以滿足市場的需求。茯苓的人工栽培雖早已實現(xiàn)，但在貴州尚未形成規(guī)?；脑耘?/p>

2、基地，菌種退化成為限制其發(fā)展的瓶頸之一。本課題通過一系列研究初步建立茯苓菌株的復壯體系，為實現(xiàn)茯苓的GPA基地建設和規(guī)?；a奠定基礎。 本研究對茯苓菌核進行組織分離，對分離菌株進行菌絲形態(tài)及熒光核染色顯微觀察。并分別采用了紫外光照射培養(yǎng)、菌絲尖端轉接分離、茯苓菌核分離復壯和單孢分離復壯，結果表明四種復壯方式均可達到一定的復壯效果，將菌絲尖端轉接分離與單孢分離復壯法結合是比較理想的復壯方式。 對培養(yǎng)基成分、光照條件、培養(yǎng)

3、溫度、傳代次數(shù)等對茯苓菌株在實驗室條件下形成子實體的最適培養(yǎng)條件進行了研究。結果表明，茯苓菌株子實體產生的最適培養(yǎng)條件為：在馬鈴薯瓊脂糖培養(yǎng)基(PDA)上，培養(yǎng)溫度(27±1)℃，光照強度60％(12000LX光照培養(yǎng)箱)，傳代次數(shù)5～7代，空氣相對濕度75％左右，培養(yǎng)時間18～30d，形成的子實體形態(tài)和數(shù)量各不相同，可形成蜂窩狀、山狀、迷宮狀、小菊花狀或針狀的子實體，單身或群生。 采用稀釋法分離茯苓單孢子，并進行單孢子萌發(fā)實驗

4、。結果表明在26℃條件下孢子萌發(fā)率最高，為45％。擔孢子萌發(fā)形成的菌絲較為濃密，呈白色短絨狀，氣生菌絲不明顯，生長緩慢。單孢萌發(fā)菌絲形成的菌落形態(tài)、菌絲生長速度和氣生菌絲濃密程度均有明顯差異，且遺傳穩(wěn)定性好。單孢配對實驗表明，同一菌株擔孢子間配對都出現(xiàn)明顯拮抗線，但其中少數(shù)配對隨著培養(yǎng)時間增加在交接區(qū)形成扇形區(qū)域，拮抗線隨后消失。而不同菌株擔孢子間的配對則全部形成穩(wěn)定的柵欄型菌落，不能和諧生長。 栽培試驗結果顯示，不同茯苓菌株野