微泡超聲空化的肝生物學(xué)效應(yīng)及對(duì)肝酒精消融的倍增作用.pdf

1、研究背景：
　　 經(jīng)皮無(wú)水酒精消融(Percutaneous ethanol ablation，PEA)是臨床治療小肝癌有效、安全的方法之一。自1983年Sugiura等首次提出在超聲引導(dǎo)下經(jīng)皮注射無(wú)水酒精可以有效消融治療肝癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)以來(lái)，經(jīng)過(guò)反復(fù)驗(yàn)證，PEA治療小肝癌的方法在臨床上已被廣泛接受和應(yīng)用。
　　 一般來(lái)說(shuō)，PEA適用于直徑小于3cm的肝臟腫瘤。因?yàn)镻EA本

2、質(zhì)上是一種經(jīng)皮化學(xué)消融的介入治療方法，在實(shí)施過(guò)程中，腫瘤內(nèi)部豐富的血供使注入的酒精快速消散，導(dǎo)致高濃度的酒精難以在腫瘤部位聚集。故PEA難以產(chǎn)生較大的、球形形狀的消融灶，對(duì)于直徑大于3cm的肝癌治療效果差。
　　 本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，微泡增強(qiáng)的超聲空化不僅可以阻斷腫瘤血流灌注長(zhǎng)達(dá)24h，還可有效阻斷肝臟血流灌注15-30min?；诖?，該效應(yīng)可能使PEA注射的酒精停留在肝臟腫瘤局部的時(shí)間增加，增強(qiáng)治療效果并增加消融體積。

3、>　　 研究目的：
　　 1.了解微泡增強(qiáng)超聲空化阻斷兔肝臟血流可能產(chǎn)生的副作用。
　　 2.超聲空化聯(lián)合酒精消融是否可以顯著增加酒精消融正常肝臟的效果。
　　 材料與方法
　　 1.實(shí)驗(yàn)材料：
　　 實(shí)驗(yàn)儀器：C2-960型脈沖式超聲空化治療儀，是一種小型數(shù)字化高聲壓、非聚焦式超聲治療裝置，主要由數(shù)字脈沖發(fā)生器、高聲壓數(shù)字脈沖功率放大器、組合式晶片治療頭和工作站控制系統(tǒng)組成，其超聲脈沖的特點(diǎn)是

4、：脈沖式、間歇式、高聲壓超聲發(fā)射，熱效應(yīng)微小。2-4MPa的高峰值聲壓和一定的脈沖寬度有利于激勵(lì)循環(huán)微泡發(fā)生劇烈的慣性空化(Inertial cavitation，IC)。本實(shí)驗(yàn)室采用的治療探頭頻率831 KHz，平均聲強(qiáng)(ISPTA)1.3 W/cm2，占空比0.22％，峰值負(fù)壓4.26 MPa，采取工作6秒間歇6秒的交替治療模式。
　　 實(shí)驗(yàn)試劑：“脂氟顯”脂質(zhì)微泡，平均粒徑2μm，核心氣體為全氟丙烷，乳白色凝乳狀外觀，濃度

5、約為4～9×109/ml，由本單位自制。實(shí)驗(yàn)中用于超聲造影及治療，在超聲造影時(shí)的使用計(jì)量為0.02ml/kg，超聲治療時(shí)的使用劑量0.1ml/kg。
　　 2.實(shí)驗(yàn)方法：
　　 2.1超聲空化阻斷對(duì)兔肝血流灌注的影響：
　　 健康新西蘭大白兔21只，平均體質(zhì)量2.0～2.5kg，隨機(jī)分為3組(每組7只)：分別為一次超聲空化組、兩次超聲空化組和單純超聲組。超聲空化處理均采用經(jīng)兔耳緣靜脈注射脂質(zhì)微泡(劑量0.1 ml

6、/kg體質(zhì)量)聯(lián)合峰值負(fù)壓4.26 MPa的脈沖式超聲治療儀，經(jīng)開(kāi)腹暴露肝臟后直接超聲照射5 min。實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，一次超聲空化組實(shí)驗(yàn)中僅治療1次；兩次超聲空化組于靶區(qū)肝葉空化治療1次后(與一次超聲空化組相同)間隔1h再次行超聲空化治療；單純超聲組不再做空化治療，僅用3 ml生理鹽水代替微泡。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均行無(wú)菌手術(shù)操作，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后48h時(shí)間點(diǎn)行安樂(lè)死并每組選取一只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，獲取肝臟標(biāo)本，行病理檢查。各組實(shí)驗(yàn)兔在治療前、治療后即刻、3

7、0 min、60 min及48h，實(shí)施超聲造影(Contrast enhanced ultrasound，CEUS)檢查，并計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)峰值強(qiáng)度(PI)變化。
　　 2.2超聲空化聯(lián)合酒精消融兔正常肝臟的實(shí)驗(yàn)研究：
　　 健康新西蘭大白兔24只，隨機(jī)分為三組，超聲空化聯(lián)合酒精消融組9只，單純超聲空化組9只，單純酒精消融組6只。實(shí)驗(yàn)中行無(wú)菌外科手術(shù)操作暴露實(shí)驗(yàn)兔肝臟，超聲空化聯(lián)合酒精消融做聯(lián)合治療，酒精消融推注量為0.05

8、mL。超聲空化處理采用經(jīng)靜脈注射脂質(zhì)微泡的同時(shí)聯(lián)合峰值負(fù)壓為4.26MPa的脈沖式超聲治療儀直接輻照肝5min。超聲造影觀察評(píng)估治療前后肝臟血流灌注情況，48h后取標(biāo)本，量筒法測(cè)量肝臟壞死組織體積。
　　 結(jié)果
　　 1.微泡增強(qiáng)的超聲空化對(duì)實(shí)驗(yàn)免正常肝血流灌注的影響：
　　 一次超聲空化組在治療后即刻和30min顯示出明顯差異，靶區(qū)肝實(shí)質(zhì)在空化治療前表現(xiàn)為均勻增強(qiáng)，在治療后則為非增強(qiáng)缺損。觀察TIC變化，其PI

9、值亦由(-51.88±4.26)dB降至(-62.53±4.83)dB，48h后血流灌注恢復(fù)，PI值升至(-52.02±4.59)dB。兩次超聲空化治療后即刻、30min，非增強(qiáng)缺損面積大于一次超聲空化組，PI值變化亦與一次超聲空化治療組類似。單純超聲組治療前和治療后即刻超聲造影觀察均無(wú)明顯變化。病理檢查發(fā)現(xiàn)一次超聲空化組及兩次超聲空化組肝臟均出現(xiàn)散在微小壞死灶。
　　
　　 2.超聲空化聯(lián)合酒精消融兔正常肝臟的實(shí)驗(yàn)研

10、究：
　　 超聲空化治療后，超聲造影觀察治療的靶區(qū)肝臟局部血流灌注消失，造影PI值由治療前的-46.9±3.8 dB降至-64.0±3.3 dB。治療后48h超聲空化聯(lián)合酒精消融組的肝臟出現(xiàn)大面積壞死，其壞死組織體積平均值為(3.3±2.3 cm3)，相比單純酒精組的壞死體積(0.3±0.2 cm3)約大10倍以上。而單純超聲空化組因壞死灶體積少、不規(guī)則而又分散，所以不計(jì)入體積。
　　 結(jié)論
　　 1.微泡增強(qiáng)的