HPLC-MS-MS法定量測(cè)定全血和組織中西羅莫司.pdf

1、本研究的目的是建立西羅莫司的靈敏、專(zhuān)屬、快速的LC-MS/MS分析方法，用于全血和組織中西羅莫司的定量測(cè)定以及臨床前藥物動(dòng)力學(xué)研究，為臨床藥代動(dòng)力學(xué)的研究提供參考。
　　本論文第一章概述了課題研究的背景和意義，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病簡(jiǎn)稱(chēng)冠心病，嚴(yán)重威脅現(xiàn)代人類(lèi)的身心健康，帶來(lái)沉重的社會(huì)公共衛(wèi)生負(fù)擔(dān)。目前，冠心病的治療主要包括藥物治療、冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)和經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療三種方式。其中，經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療技術(shù)于上世紀(jì)七十年代

2、應(yīng)用于臨床，經(jīng)過(guò)幾十年的發(fā)展，現(xiàn)已成為冠心病治療中最重要的手段之一。然而，介入治療術(shù)后支架內(nèi)再狹窄一直是影響其遠(yuǎn)期治療效果的主要因素，而隨著自2002年包括西羅莫司洗脫支架在內(nèi)的藥物洗脫支架問(wèn)世以來(lái)，冠狀動(dòng)脈支架內(nèi)再狹窄的發(fā)生率顯著降低，從而極大地改善了介入治療術(shù)的遠(yuǎn)期療效，在治療冠心病領(lǐng)域有著良好的效果和應(yīng)用前景。此外，科學(xué)家們也仍在不斷研究新的制劑和給藥方式來(lái)提高西羅莫司的生物利用度和治療效果。隨著研究的深入，為了盡可能的保證治療效

3、果和減少不良反應(yīng)的發(fā)生，對(duì)于兩羅莫司在體內(nèi)的藥動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的研究就顯的十分重要。而要評(píng)價(jià)藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)，就需要建立更加高效、靈敏、快速且專(zhuān)屬性強(qiáng)的生物樣品分析方法。
　　本論文第二章對(duì)液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)定量分析全血和組織中西羅莫司的方法進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)中優(yōu)化了液相色譜分離、質(zhì)譜分析、樣品預(yù)處理方法等實(shí)驗(yàn)條件，建立了一系列簡(jiǎn)單易行、靈敏度較高且具有良好的特異性和重現(xiàn)性、能同時(shí)適用于定量分析西羅莫司在多種生物基質(zhì)中的大量生物樣本的LC-M

4、S/MS分析方法。該方法測(cè)定西羅莫司在全血中濃度的定量范圍為50-10000 pg/ml，在組織勻漿液中的的定量范圍為50-25000 pg/ml。測(cè)定西羅莫司在豬全血，冠脈，心肌，肝臟，腎臟，肺和脾勻漿液中的日內(nèi)、日間精密度(RSD)分別小于12.2％，11.9％，5.7％，6.1％，4.5％，5.1％，7.9％。測(cè)定準(zhǔn)確度(RE)分別在-11.0％～4.7％，-7.2％～0.6％,0.9％～6.4％,-8.9％～0.0％,-4.7％

5、～1O.0％,-2.6％～10.0％,-3.6％～5.8％范圍內(nèi);測(cè)定西羅莫司在大鼠全血中的日內(nèi)、日間精密度(RSD)小于12.1％，測(cè)定準(zhǔn)確度(RE)在-1.6％～13.6％范圍內(nèi);測(cè)定西羅莫司在人全血中的日內(nèi)、日間精密度(RSD)小于6.6％，測(cè)定準(zhǔn)確度(RE)在-0.8％～14.3％范圍內(nèi)。
　　本研究所建立的LC-MS/MS分析方法靈敏、專(zhuān)屬、快速，可用于定量測(cè)定西羅莫司在全血和組織中濃度和臨床前藥物動(dòng)力學(xué)研究，為臨床藥物