薔薇屬三種植物雜交育種及月季‘薩曼莎’轉(zhuǎn)化RrFLS基因的研究.pdf

1、野薔薇(Rosa.multiflora)、月季(Rosa.chinensis)、玫瑰(Rosa.rugosa)作為中國(guó)原產(chǎn)的薔薇科(Roseceae)薔薇屬(Rosa L.)的重要代表植物，擁有豐富的遺傳基因，不僅是雜交育種的重要親本，也是分子育種中優(yōu)良基因的來(lái)源，具備園林觀賞、商業(yè)應(yīng)用等多方面的價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)一方面采用傳統(tǒng)雜交育種的方式，進(jìn)行部分月季與薔薇的遠(yuǎn)緣雜交和玫瑰品種間的雜交，為薔薇屬部分植物的育種研究提供參考。另一方面，以觀賞

2、性狀佳、適應(yīng)性強(qiáng)的切花月季‘薩曼莎’體細(xì)胞胚為材料，優(yōu)化遺傳轉(zhuǎn)化體系，并遺傳轉(zhuǎn)化玫瑰中RrFLS和RrANR基因，以獲得各方面性狀優(yōu)良的白色切花月季‘薩曼莎’。
　　1月季與薔薇雜交育種
　　月季與薔薇的雜交組合共10組，其中正反交組合共4對(duì)，分別為YF與FQ、YF與HQ、YZ與FQ、YZ與HQ，其余兩組為FQ×YH和BQ×YF。對(duì)全部雜交組合坐果率研究發(fā)現(xiàn):各雜交組合的坐果率之間差異顯著，BQ×YF雜交組合的坐果率顯著高于

3、其他組合，達(dá)36.6±7.1％。對(duì)全部雜交組合單果種子數(shù)研究發(fā)現(xiàn):各雜交組合的單果種子數(shù)之間差異顯著，YZ×FQ和BQ×YF雜交組合的單果種子數(shù)，均在10個(gè)以上，顯著高于其他組合。綜合坐果率和單果種子數(shù)分析表明:同一父本不同母本的組合之間均存在顯著差異;同一母本不同父本之間均不存在顯著差異;而相同親本的正反交組合的坐果率之間無(wú)顯著差異，但單果種子數(shù)差異顯著。因此坐果率和單果種子數(shù)與母本的關(guān)系較大，本實(shí)驗(yàn)中的YZ、YF、BQ較適合做月季與

4、薔薇雜交的母本材料，結(jié)果較好的雜交組合有YZ×FQ、YF×FQ、BQ× YF、FQ×YZ。此外，對(duì)YF與FQ的正反交及赤霉素對(duì)坐果率影響的研究發(fā)現(xiàn)，100 mg/L赤霉素處理YF的柱頭，能顯著提高YF與FQ的雜交坐果率。對(duì)目前獲得10株雜交后代進(jìn)行SRAP分析，共有3個(gè)組合獲得真雜種，分別為YZ×FQ，2株;YF1×FQ，2株;YF×HQ，1株。
　　2.玫瑰品種間的雜交育種
　　玫瑰品種間的雜交組合共6個(gè)，雜交花朵數(shù)105

5、朵，雜交果實(shí)43個(gè)。6個(gè)雜交組合的坐果率差異顯著，Sig.=0.000(P＜0.01)，多重比較結(jié)果表明，以DH為母本的雜交坐果率顯著高于其他組合，分別為69.8±2.7％、73.8±2.1％，但二者之間無(wú)顯著差異。6個(gè)雜交組合的單果種子數(shù)差異顯著，Sig.=0.000(P＞0.01)，多重比較結(jié)果表明，分別以DH、DB為母本的四個(gè)雜交組合單果種子數(shù)，顯著高于以BB為母本的雜交組合，且DH、DB為母本的四個(gè)雜交組合之間無(wú)顯著差異，平均單

6、果種子數(shù)達(dá)69.9±16.7粒。綜合坐果率、單果種子數(shù)及種子萌發(fā)情況，以DH為母本的雜交組合能獲得更多的雜交后代;對(duì)DH×ZZ的92株雜交后代莖色統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，幼苗上部的枝條顏色有全綠、全紅和綠中帶紅的混合色的性狀分離現(xiàn)象，分離比接近1∶1∶2，因此推測(cè)玫瑰莖的紫紅色可能為不完全顯性遺傳。
　　3.月季‘薩曼莎’體細(xì)胞胚成熟壯苗培養(yǎng)基的優(yōu)化
　　對(duì)轉(zhuǎn)化后的體胚在選擇增殖培養(yǎng)過(guò)程中，出現(xiàn)的體細(xì)胞胚愈傷化及體細(xì)胞胚狀態(tài)較差的問(wèn)題研究

7、發(fā)現(xiàn)，對(duì)狀態(tài)差的體胚而言，GA3濃度為0.5mg/L時(shí)，體胚成熟率顯著提高，較適合的培養(yǎng)基為:1/2MS+1.0mg/L BA+0.01mg/L NAA+0.5mg/LGA3;對(duì)于愈傷化的體細(xì)胞胚，在含有TDZ的培養(yǎng)基中更能改善愈傷化的狀態(tài)，提高體胚成熟度，較適合的培養(yǎng)基為:1/2MS+1.0mg/L BA+0.01mg/L NAA+0.1mg/LGA3+1.0mg/LTDZ。對(duì)體細(xì)胞胚萌發(fā)的幼芽生長(zhǎng)研究，在原萌發(fā)培養(yǎng)基中繼續(xù)生長(zhǎng)，不利