中華紅葉楊無菌繁殖體系建立的影響因素研究.pdf

1、本研究對(duì)中華紅葉楊無菌繁殖體系建立過程中外植體消毒方式及導(dǎo)致褐變發(fā)生的影響因素進(jìn)行了研究。 選用0.15％的氯化汞、2％的次氯酸鈉、30mg/L的抗生素溶液分別對(duì)中華紅葉楊的莖段和葉片進(jìn)行消毒，在消毒過程中，三種消毒劑又分別設(shè)置了不同的消毒時(shí)間，然后都接種于同種培養(yǎng)基上，統(tǒng)計(jì)其污染率并觀察其生長狀況。結(jié)果表明：莖段用0.15％的氯化汞消毒10分鐘，污染率少，生長狀況良好；用2％的次氯酸鈉消毒20分鐘，污染率很高，外植體前期生長狀

2、況優(yōu)于用氯化汞消毒的外植體;抗生素在30分鐘內(nèi)起不到消毒的效果。葉片用0.15％的氯化汞消毒8分鐘，污染率小，生長狀況良好；用2％的次氯酸鈉消毒12分鐘，污染率高，但生長狀況較好；抗生素在20分鐘內(nèi)達(dá)不到對(duì)葉片消毒的效果。 對(duì)影響外植體褐化的不同因素做了研究。在預(yù)處理對(duì)外植體褐化的影響中，外植體低溫預(yù)處理并與簡(jiǎn)單培養(yǎng)基培養(yǎng)相結(jié)合的方法，外植體的褐化率低，抑制褐化效果好；外植體表面消毒前用PVP和Vc混合液分別振蕩處理，也能明顯地

3、降低褐化率，但以Vc混合液振蕩處理效果好。 在培養(yǎng)基對(duì)褐化的影響中，pH值對(duì)褐化率有明顯影響，其影響趨勢(shì)是：在一定pH值范圍(5.0～6.5)內(nèi)，pH值越低，褐化率越低；無機(jī)鹽濃度影響外植體的褐化率，表現(xiàn)為：無機(jī)鹽濃度低，褐化率低；在瓊脂濃度5.0～6.5g/L范圍內(nèi)，瓊脂濃度越大，培養(yǎng)基越硬，褐化率越低；低蔗糖濃度有利于降低褐化率，本試驗(yàn)中以2％蔗糖濃度培養(yǎng)下的外植體褐化率最低；活性炭對(duì)褐化率有明顯影響，但其濃度要適宜，以每升