四川阿壩紅花綠絨蒿內(nèi)生及根際放線菌多樣性.pdf

1、藥用植物紅花綠絨蒿生長(zhǎng)于高海拔地區(qū)，而四川阿壩州生態(tài)環(huán)境特殊適合微生物生長(zhǎng)，本研究旨在探究紅花綠絨蒿內(nèi)生及根際土壤放線菌的多樣性及群落結(jié)構(gòu)。從阿壩州6個(gè)不同地理位置采集紅花綠絨蒿樣品，表面消毒后通過(guò)可培養(yǎng)和免培養(yǎng)方法對(duì)植物內(nèi)生及根際放線菌多樣性進(jìn)行研究，研究結(jié)果表明:
　　(1)放線菌的分離受多種因素影響，土壤導(dǎo)電率低于1的樣品分離的數(shù)量最少;土壤有機(jī)質(zhì)與放線菌分離數(shù)量在一定范圍內(nèi)呈正相關(guān)關(guān)系;采樣海拔與內(nèi)生放線菌和根際土壤放線菌

2、分布呈正相關(guān)和負(fù)相關(guān)關(guān)系。本研究中培養(yǎng)基分離得到的放線菌數(shù)量存在明顯差異，10種不同的培養(yǎng)基分離得到的放線菌存在明顯差異，其中高氏一號(hào)培養(yǎng)基和改良脯氨酸培養(yǎng)基分離到的內(nèi)生放線菌最多，最少的是甲殼素培養(yǎng)基;在根際土壤放線菌分離中，高氏一號(hào)分離到的數(shù)量最多，甲殼素、SCN和腐殖酸培養(yǎng)基分離到的最少，從中可以看出高氏一號(hào)在兩者之間都是分離效果最好的;在紅花綠絨蒿各組織中內(nèi)生放線菌分離的數(shù)量表明根(18)＞葉(17)＞莖(9)＞花(8)。

3、>　　(2)選擇7種放線菌表形特征結(jié)合加權(quán)計(jì)算對(duì)紅花綠絨蒿放線菌多樣性進(jìn)行初探，篩選出56株進(jìn)行深入研究，通過(guò)ARDRA-RLFP和PCR-BOX分析表明，32株內(nèi)生放線菌和24株根際放線菌具有一定差異，其多樣性較為豐富但簇群分布不均勻。對(duì)代表菌株測(cè)序并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)可知，測(cè)序菌株包括鏈霉菌屬(Streptomyces)、北里孢菌屬(Kitasatospora)、厄氏菌屬（Oerskovia）及分類到綱的稀有放線菌SCAUEjDS1，其

4、中鏈霉菌屬為優(yōu)勢(shì)菌群占總數(shù)的78％，且莖中分離的放線菌多樣性最好。
　　(3)經(jīng)過(guò)PCR-DGGE技術(shù)分析表明，不同地理位置的紅花綠絨蒿，根的多樣性指數(shù)為:A＞F＞E＞D＞C＞B（A為松潘尕力臺(tái)海拔3553m;B為紅原安曲鄉(xiāng)海拔3523m;C為馬爾康夢(mèng)筆山海拔3894m;D為小金縣海拔3789m;E為小金縣巴郎山海拔4120m;F為小金縣海拔4114m，下同）;莖的多樣性指數(shù)為:A＞D＞E＞B＞C＞F;葉的多樣性指數(shù)為:A＞B＞D

5、＞C＞E＞F;花的多樣性指數(shù)為:B＞D＞E＞C＞F＞A。而同一地理位置紅花綠絨蒿組織之間的多樣性指數(shù)為松潘尕力臺(tái):莖＞葉＞根＞花;紅原安曲鄉(xiāng):花＞葉＞莖＞根;馬爾康夢(mèng)筆山:葉＞花＞莖＞根;小金縣（海拔3789m）:花＞莖＞葉＞根;小金縣巴郎山:莖＞花＞葉＞根;小金縣(海拔4114m):莖＞根＞葉＞花。6地根際土壤放線菌多樣性指數(shù)為:E＞D＞A＞F＞C＞B。通過(guò)測(cè)序條帶系統(tǒng)發(fā)育發(fā)現(xiàn)紅花綠絨蒿內(nèi)生放線菌可分為8簇遺傳群落，紅球菌屬(Rhod

6、ococcus)為優(yōu)勢(shì)菌群占總數(shù)的65％，其余還包括棒桿菌屬(Corynebacterium)、諾卡氏菌屬(Nocardia)、微球菌屬(Micrococcus)、棲霉菌屬（Mycetocola）、微桿菌屬（Microbacterium）假諾卡氏菌屬(Pseudonocardia)和鏈霉菌屬(Streptomyces)。紅花綠絨蒿不同組織中內(nèi)生放線菌的種群分布為:莖（5個(gè)）＞根、葉（3個(gè)）＞花（2個(gè)）;不同地理位置紅花綠絨蒿內(nèi)生放線菌分

7、布情況為:紅原安曲鄉(xiāng)(3523m)，小金縣巴郎山(4120m)，小金縣(4114m)種群分布最多3個(gè)屬，松潘尕力臺(tái)(3553m)，馬爾康夢(mèng)筆山(3894m)分布兩個(gè)屬，小金縣(3789m)分布一個(gè)屬。
　　可培養(yǎng)和免培養(yǎng)結(jié)合能更全面了解紅花綠絨蒿內(nèi)生放線菌多樣性。該研究表明紅花綠絨蒿根莖葉花組織中放線菌具有豐富的多樣性，其組織內(nèi)分布的放線菌種類及其次級(jí)代謝產(chǎn)物都有很大的利用價(jià)值和潛在的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，研究和利用阿壩地區(qū)綠絨蒿內(nèi)生放線菌資