谷氨酸及3％NaCl對體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞的影響及機制探討.pdf

1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文谷氨酸及3%NaCl對體外培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞的影響及機制探討姓名：黃芙蓉申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：兒科指導(dǎo)教師：岳少杰20080501碩士學(xué)位論文中文摘要第一章谷氨酸及其受體在星形膠質(zhì)細胞水腫中的作用及機制研究方法將體外培養(yǎng)好的AS分為空白對照組、Glu組(Oimmmol／L)、NMDA組(Oimmmol／L)、MK一801組(0Olmmol／L)、GIuMK一801組和NMDAMK801組。后兩組先加入MK一801預(yù)處

2、理30分鐘后再加入Glu或NMDA。各組在試劑加入2d時后終止實驗進行免疫組化、MTT、LDH、Ca2、NaKATP酶活力、細胞形態(tài)及Rea卜TimePCRAQP4InIiNA和流式AQP4測定。結(jié)果1免疫組化細胞原代培養(yǎng)后繼續(xù)傳代至第四代，進行免疫組化鑒定，AS純度達98％以上。2細胞存活率和細胞培養(yǎng)液中LDH含量各組之間細胞的存活率和細胞培養(yǎng)液中LDH含量均無統(tǒng)計學(xué)差異，表明本研究所用濃度未引起細胞的細胞膜損傷、也未引起細胞死亡。3

3、細胞形態(tài)學(xué)變化：Glu和NMDA可引起細胞的周長、面積和體積均明顯增加(pO01)，MK801可以明顯地抑#jljGlu和NMDA所致細胞形態(tài)的改變(pO01)。4細胞內(nèi)Ca2濃度：Glu和NMDA可使細胞內(nèi)Ca2濃度明顯增高(pO01)，其中NMDA的效應(yīng)大于Glu(pO05)；MK801可以減少Glu和NMDA所致細胞內(nèi)鈣離子濃度的增加(pO01)。MK一801組不引起細胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。5細胞內(nèi)NaK_ATP酶活力：Glu與N

4、MDA使細胞內(nèi)Na一K_ATP酶活力均明顯降低(PO01)，以Glu的效應(yīng)更明顯；MK801可以抑$1]Glu和NMDA所致細胞Na一KATP酶活性降低(PO01)。6AQP4mRNA水平及AQP4熒光強度表達：Glu與NMDA使細胞內(nèi)AQP4mRNA水平及細胞膜AQP4熒光強度表達均明星增高(PO01)，Glu效應(yīng)更明顯；MK801可以抑制G1u和NM【DA所致AQP4的變化(PO01)。結(jié)論1谷氨酸和NMDA可以抑制AS細胞膜Na一