TS、DNA-PKcs和GST-π在胃癌組織中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、胃癌是我國最常見的消化道惡性腫瘤，其發(fā)病率高，死亡率為惡性腫瘤中的第二位。早期胃癌的治療以手術(shù)為主，輔以化療；而晚期胃癌則以化療為主要的治療手段。然而因腫瘤的原發(fā)或獲得性對化療藥物的不敏感而導(dǎo)致的多藥耐藥問題常常影響化療效果，這是臨床最常見而又最難解決的問題之一。 所謂多藥耐藥(multi-drug resistance，MDR)，即腫瘤細(xì)胞對化學(xué)結(jié)構(gòu)完全不同、作用機(jī)制各異的抗癌藥物交叉耐藥的現(xiàn)象。其產(chǎn)生機(jī)制非常復(fù)雜，目前基本明

2、確的有：①藥物轉(zhuǎn)運(yùn)功能蛋白，具有藥物泵的功能；②藥物代謝功能酶，參與機(jī)體解毒功能，如谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶-Pi(GST-π)等；③化療藥物靶酶，如胸苷酸合酶(TS)等，其定量或定性的改變直接影響藥物療效；④DNA損傷修復(fù)功能增強(qiáng)，如DNA-依賴蛋白激酶催化亞單位(DNA-PKcs)等；⑤與細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡相關(guān)的基因；⑥與信號傳導(dǎo)系統(tǒng)相關(guān)的基因。 以氟尿嘧啶類和鉑類藥物為主的化療是治療胃癌的主要手段之一。TS、DNA-PKc

3、s和GST-π均在多藥耐藥中發(fā)揮重要作用，聯(lián)合檢測它們在胃癌組織中的表達(dá)，國內(nèi)外尚未見報(bào)道。本研究旨在探討聯(lián)合檢測TS、DNA-PKcs和GST-π在胃癌組織中的表達(dá)及其臨床意義。 材料與方法 1、病例和標(biāo)本： 124例胃癌及癌旁組織石蠟標(biāo)本來自于中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院和遼寧省腫瘤醫(yī)院接受胃大部切除術(shù)的病人，患者術(shù)前均未接受化療；男92例，女32例，中位年齡60歲；病理均為腺癌，高分化11例，中分化29例，低分

4、化84例；侵犯肌層76例，侵犯漿膜層48例；發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移100例；TNM分期：Ⅰ期17例，Ⅱ期46例，Ⅲ期37例，Ⅳ期24例。124例胃癌組織取其中16例距胃癌組織5厘米以遠(yuǎn)的正常組織作為對照。 2、試劑： DNA-PKcs為鼠抗人單克隆抗體，購自NewMarkers生物技術(shù)開發(fā)有限公司；TS、GST-π均為鼠抗人單克隆抗體，其與S-P檢測試劑盒、DAB顯色液均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。 3、方法：

5、 將124例胃癌標(biāo)本與16例正常胃組織標(biāo)本構(gòu)建成組織芯片，采用免疫組化S-P法，按照S-P檢測試劑盒說明書所示步驟進(jìn)行，切片經(jīng)檸檬酸緩沖液(PH=6.0)高壓熱修復(fù)預(yù)處理。 4、結(jié)果判定： TS、GST-π的判定以胞漿和/或胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒為顯色，DNA-PKcs的判定以胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒為顯色。判斷標(biāo)準(zhǔn)：陰性(一)：陽性細(xì)胞染色≤10％；陽性(+)：陽性細(xì)胞>10％。 5、統(tǒng)計(jì)分析方法： 采用

6、SPSS11.5軟件，進(jìn)行x<'2>檢驗(yàn)、Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)和Fisher精確計(jì)算概率法，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1、TS和GST-π在胃癌組織中的陽性表達(dá)率分別為81.5％、76.6％，均高于在癌旁5厘米的正常胃黏膜組織中的表達(dá)(P<0.05)；DNA-PKcs在胃癌組織中的陽性表達(dá)率為69.4％，與癌旁5厘米的正常胃黏膜組織中的表達(dá)相近(P>0.05)。 2、TS和DNA-PKcs

7、在低分化腺癌中的表達(dá)均高于高、中分化腺癌，GST-π在高、中分化腺癌中的表達(dá)高于低分化腺癌(P<0.05)；TS的陽性表達(dá)隨TNMI臨床分期而增高(P<0.05)；DNA-PKcs的陽性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的有無相關(guān)(P<0.05)。 3、TS和DNA-PKcs的表達(dá)呈正相關(guān)(r<,s>=0.178，P<0.05)，而GST-π和TS以及GST-π和DNA-PKcs之間均無相關(guān)性(P>0.05)。 結(jié)論： 1、構(gòu)建組

8、織芯片進(jìn)行免疫組化檢測具有產(chǎn)出量高、成本低、誤差小及準(zhǔn)確性和精確性大等優(yōu)點(diǎn)。 2、TS和GST-π可能是引起胃癌原發(fā)性耐藥的因素之一；TS和DNA-PKcs的陽性表達(dá)與腫瘤的低分化、臨床分期晚或淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，間接提示TS和DNA-PKcs可能作為腫瘤預(yù)后的判斷指標(biāo)。 3、TS和DNA-PKcs的表達(dá)呈正相關(guān)，可能反映了腫瘤細(xì)胞中DNA復(fù)制及損傷修復(fù)活性的協(xié)調(diào)一致性。 4、TS、DNA-PKcs和GST-π在胃癌