不同保存液對(duì)靜脈移植物保護(hù)作用的對(duì)比研究.pdf

1、背景與目的：冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)(coronaryarterybypassgrafting，CABG)是目前最有效的治療冠心病的方式之一。橋血管主要來(lái)源于乳內(nèi)動(dòng)脈(internalmammaryartery,IMA)、胃網(wǎng)膜右動(dòng)脈(rightgastroomentalartery,RGEA)、橈動(dòng)脈(radicalartery)、大隱靜脈橋(saphenousveingraft，SVG)等，各種動(dòng)脈橋尤其是IMA很少發(fā)生粥樣硬化其十年通暢

2、率約為90％，已成為廣泛接受和首先考慮應(yīng)用的血管橋。但是SVG具有來(lái)源充分、口徑夠大、易于離取等優(yōu)點(diǎn)，仍然是主要的橋血管來(lái)源。據(jù)報(bào)道，靜脈血管橋的第一年再狹窄率約是20％；且以后每年以2％-4％的再狹窄率遞增，其十年通暢率約是40％-50％。SVG再狹窄可發(fā)生于術(shù)后早期和晚期。早期以血栓阻塞為主；晚期以內(nèi)膜增生和粥樣硬化形成導(dǎo)致的管腔狹窄為主。SVG狹窄的中心環(huán)節(jié)是靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷和脫落。CABG術(shù)引起血管內(nèi)皮細(xì)胞(vascula

3、rendothelialcell，VEC)損傷的因素是多方面的：①在SVG的制備過程中，離取技術(shù)的不當(dāng)；②壓力擴(kuò)張；③體外保存過程中非生理狀態(tài)下靜脈內(nèi)皮的損傷；④術(shù)后缺血再灌注損傷、高切應(yīng)力等。其中體外保存以成為廣受關(guān)注的領(lǐng)域，各種保存液的研究已是國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。本研究主要通過觀察內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化及功能代謝改變對(duì)比幾種不同的保存液對(duì)靜脈橋的保護(hù)作用，以期找到較理想的血管保存液，提高SVG的近、遠(yuǎn)期通暢率，為臨床推廣和應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)

4、依據(jù)。通過測(cè)定單位面積VEC合成和釋放一氧化氮(nitricoxide，NO)及保存液中內(nèi)皮素(endothelin，ET)含量，說(shuō)明內(nèi)皮細(xì)胞功能代謝變化，通過觀察VEC脫落情況，說(shuō)明VEC形態(tài)結(jié)構(gòu)變化。 材料與方法：十只成年的中國(guó)家兔，雌雄不限，體重2500-3000克，平均為2700±250克。取雙側(cè)股靜脈2cm，均勻地分為四段，共80段分別放入林格液、罌粟堿溶液(papaverinesolution，Pap)、UW液(Un

5、iversityofWisconsinsolution)、異博定-硝酸甘油復(fù)合溶液(nitroglycerin-verapamilsolution，GV)等4ml的保存液中，室溫下(18-20℃)一個(gè)小時(shí)后，做HE染色、及硝酸還原酶法測(cè)定單位面積內(nèi)皮細(xì)胞NO的合成和釋放量及特異性放射免疫法測(cè)定保存液中內(nèi)皮素的含量。內(nèi)皮細(xì)胞地脫落情況評(píng)價(jià)以每高倍視野下股靜脈內(nèi)膜固有層表面內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋比例表示，每組保存液靜脈段取二十張切片，每張切片隨機(jī)取5

6、個(gè)高倍視野記錄其內(nèi)皮脫落情況，求其平均值，＞75％為+；50～75％為++；25～50％為+++；＜25％為++++。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，應(yīng)用SPSSl0.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，等級(jí)數(shù)據(jù)用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)，計(jì)量數(shù)據(jù)用(-x)±s表示，用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)的單因素方差分析，p≤0.05認(rèn)為差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果：(1)單位面積VEC合成和釋放的NO的量：在GV組中為2.09±0.30umol/mm2、在Pap組中為1.06±0.39umol

7、/mm2、在林格液中為0.75±0.30umol/mm2、在UW液中為1.68±0.25umol/mm2，四組間比較p≤0.05差別具有顯著性； (2)各組保存液中ET的含量：在GV組為40.73±5.13pg/ml、Pap組為67.63±5.27pg/ml、林格液中為78.63±5.37pg/ml、UW液中為53.12±5.25pg/ml，P≤0.01差別有顯著性。 (3)內(nèi)皮細(xì)胞損傷和脫落率：在GV組約為20％；UW

8、液中約為40％；Pap中約為55％；在林格中約為80％，p≤0.05差別具有顯著性。 結(jié)論(1)林格液使單位面積的內(nèi)皮細(xì)胞合成和釋放NO量顯著降低；保存液內(nèi)ET含量明顯增加；內(nèi)皮細(xì)胞損傷和脫落的程度較嚴(yán)重，不能有效保護(hù)靜脈血管。 (2)Pap能夠使單位面積內(nèi)皮細(xì)胞合成和釋放NO的量降低；且其ET的增高，形態(tài)學(xué)上內(nèi)皮細(xì)胞損傷和脫落的程度嚴(yán)重，說(shuō)明在室溫罌粟堿溶液對(duì)靜脈血管保護(hù)作用不好。 (3)UW液使單位面積內(nèi)皮細(xì)