溴丙烷男(雄)性生殖毒性及凋亡機(jī)制的研究.pdf

1、目的：通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及職業(yè)人群的調(diào)查，闡明溴丙烷兩種同分異構(gòu)體對(duì)男（雄）性生殖系統(tǒng)的毒性作用，以及通過動(dòng)物模型探討溴丙烷生殖毒性的作用機(jī)理。本研究為最終闡明溴丙烷的人類生殖毒性，制定溴丙烷的職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)提供理論依據(jù)。
　　 方法：⑴選取某兩省的5家1-溴丙烷生產(chǎn)工廠的85名男性工人為暴露組，86名不接觸有毒有害化學(xué)物質(zhì)的男性工人為對(duì)照組。受過培訓(xùn)的專業(yè)調(diào)查人員對(duì)兩組工人進(jìn)行問卷調(diào)查，采用氣象色譜質(zhì)譜法分析工人接觸溴丙烷的外暴露濃度

2、，并采集工人的精液進(jìn)行常規(guī)分析。⑵21只雄性大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組，1-溴丙烷組和2-溴丙烷組，溴丙烷處理組每天經(jīng)腹腔注射1g/kg的溴丙烷，對(duì)照組注射溶劑橄欖油，連續(xù)腹腔注射2 周。對(duì)大鼠的附睪進(jìn)行精子數(shù)量和形態(tài)學(xué)評(píng)價(jià)；運(yùn)用HE 染色對(duì)睪丸的病理變化進(jìn)行評(píng)價(jià)；運(yùn)用TUNEL 染色法和Caspase-3活性的免疫組化法對(duì)大鼠睪丸的凋亡損傷進(jìn)行評(píng)價(jià)；利用化學(xué)比色法對(duì)附睪和睪丸的GSH和MDA等氧化應(yīng)激指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定；實(shí)時(shí)定量PCR法和Weste

3、rn blotting 對(duì)凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2、P53、Fas和FasL的mRNA和蛋白表達(dá)水平進(jìn)行測(cè)定。
　　 結(jié)果：①人群調(diào)查結(jié)果顯示，1-BP低暴露組工人精液質(zhì)量較對(duì)照組人群無明顯變化，而1-BP 中暴露組和高暴露組工人精液粘稠度和精子量顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。②動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，1-BP 暴露使大鼠體重和生殖器重量均低于對(duì)照組（P<0.05），而2-BP 只影響大鼠體重；與對(duì)照組相比，BPs的暴露使大鼠

4、附睪精子的絕對(duì)數(shù)量和相對(duì)數(shù)量均顯著降低（P<0.01），1-BP 主要使精子無尾比例增加（P<0.01），而2-BP 主要使大鼠精子中頭部異常精子的比例增加（P<0.01）；對(duì)照組和1-BP 組睪丸組織的病理切片未見生精小管和生殖細(xì)胞發(fā)生明顯的異常改變，而2-BP 暴露使得大鼠睪丸的生殖細(xì)胞減少，生精小管發(fā)生萎縮壞死，并有空泡的出現(xiàn)；TUNEL 結(jié)果顯示，對(duì)照組大鼠睪丸的生精小管中很少出現(xiàn)陽(yáng)性凋亡細(xì)胞，BPs 使大鼠睪丸的平均每生精小管

5、的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且2-BP 凋亡較1-BP 嚴(yán)重；2-BP 暴露使得Caspase-3 active的活性顯著高于對(duì)照組。與對(duì)照組相比，1-BP 組大鼠睪丸組織中凋亡相關(guān)基因mRNA和蛋白表達(dá)水平變化無差異，而2-BP 暴露可使大鼠睪丸的p53、Bax和Bcl-2等3個(gè)基因mRNA和蛋白表達(dá)水平下調(diào)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01，P<0.01，P<0.01），但Fas和FasL的變化與對(duì)照組相比，差

6、異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：通過對(duì)1-BP 生產(chǎn)工廠工人的研究發(fā)現(xiàn)，1-BP對(duì)接觸的工人具有一定的生殖毒性。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也證實(shí)，相同劑量的條件下BPs 兩種同分異構(gòu)體都對(duì)大鼠具有一定的毒性作用，但兩者具有不同的作用靶器官，且2-BP的生殖毒性可能高于1-BP。1-BP 可能是通過影響精子的成熟、獲能或其他途徑，導(dǎo)致了精子釋放的延遲和精子形態(tài)的異常。2-BP可能是通過激活生殖細(xì)胞的凋亡，從而引起生殖細(xì)胞的變性和死亡，產(chǎn)生生殖毒