葡萄組培脫毒快繁技術(shù)研究.pdf

1、本論文以金星無核、維多利亞、藤稔等三個葡萄品種的新梢單芽莖段為材料，探討了不同外植體消毒時間、不同外植體大小、不同培養(yǎng)基對葡萄組培快繁的影響。試驗結(jié)果如下： 將三種不同消毒時間處理的金星無核外植體接種到啟動培養(yǎng)基中培養(yǎng)，20天后統(tǒng)計全部污染率、褐變率和成活率。試驗結(jié)果表明，當外植體用0.1％升汞消毒5min時，污染率最高68％，褐變率最低13％；當外植體用0.1％升汞消毒8min時，污染率和褐變率適中，成活率最高54％；當外植體

2、用0.1％升汞消毒11min時，污染率最低2％，褐變率最高86％。金星無核外植體適宜的消毒時間為8min。 將三種不同大小的金星無核外植體接種到啟動培養(yǎng)基中培養(yǎng)，30天后統(tǒng)計莖段萌芽率及觀察芽的生長情況。試驗結(jié)果表明，0.2～0.5cm外植體總體萌芽較慢，芽的生長也較慢，愈傷組織較少；0.5～1.0cm外植體萌芽較快，芽的生長也較快，植株健壯，愈傷組織較多；1.0～2.0cm外植體愈傷組織較少，萌芽較快，但生長較細弱，三種不同大

3、小外植體的萌芽率分別為62％、67％和61％。金星無核葡萄組培適宜的外植大小為0.5～1.0cm。 以金星無核外植體為材料，以1/2MS為基本培養(yǎng)基，探討不同6—BA濃度對葡萄啟動培養(yǎng)的影響。試驗結(jié)果表明，當6—BA濃度為0.5mg/L時，金星無核的萌芽率為36％，增殖系數(shù)為0.4；當6—BA濃度為1.0mg/L時，金星無核的萌芽率為59％，增殖系數(shù)為1.4；當6—BA濃度為2.0mg/L時，金星無核的萌芽率為62％，增殖系數(shù)為

4、1.5。金星無核葡萄組培適宜的啟動培養(yǎng)基為1/2MS+6—BA1.0mg/L+IBA0.05mg/L。 以金星無核無菌苗為材料進行生根培養(yǎng)，選用1/2MS為基本培養(yǎng)基，探討不同激素配比對葡萄組培苗生根的影響。試驗結(jié)果表明，金星無核葡萄適宜的生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA0.5mg/L。 以金星無核、維多利亞、藤稔等三個不同葡萄品種的外植體為材料，以1/2MS+6—BA1.0mg/L+IBA0.05mg/L為啟動培養(yǎng)基，對

5、比不同葡萄品種的組培效果。試驗結(jié)果表明，金星無核、維多利亞、藤稔的萌芽率分別為59％、50％、18％，增殖系數(shù)分別為1.3、1.1、0.3。藤稔的萌芽率與另外兩個品種的萌芽率存在顯著差異，金星無核、維多利亞兩個葡萄品種比藤稔更適宜采用組培方法進行繁殖。 將金星無核、維多利亞、藤稔啟動培養(yǎng)中產(chǎn)生的愈傷組織轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基MS(改)+6—BA0.5mg/L+NAA0.1m/L中，探討不同葡萄品種愈傷組織分化率與增殖系數(shù)。試驗結(jié)果表明，

6、維多利亞愈傷組織分化率最高73％，金星無核愈傷組織分化率較高70％，分化出的苗質(zhì)量最好，藤稔愈傷組織分化率最低23％，增殖最慢。 維多利亞在繼代培養(yǎng)過程中出現(xiàn)一些畸形黃化癥狀，其原因可能與6—BA濃度過高或外植體本身帶毒有關(guān)。在葡萄愈傷組織誘導分化試驗中，有極少數(shù)愈傷組織會分化出細長的根而不形成苗，其原因有待進一步研究。 本論文對三個優(yōu)良鮮食葡萄新品種進行了組培脫毒快繁技術(shù)研究，該技術(shù)對葡萄無病毒苗木繁育體系建設(shè)及促進葡