堿茅Put-R40g3基因在逆境脅迫下的功能解析.pdf

1、當(dāng)前，鹽堿地面積的不斷擴(kuò)大對(duì)農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)和農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)的繁榮都產(chǎn)生了嚴(yán)重的影響，因此對(duì)鹽堿地資源的開發(fā)和利用有著極其重要的現(xiàn)實(shí)意義。
　　本論文以這一現(xiàn)狀為研究背景，采用堿茅(Puccinellia tenuiflora)作為試驗(yàn)材料，從堿茅cDNA文庫中分離得到Put-R40g3基因(登錄號(hào):AB465547)?？寺〉腸DNA全長為869bp，其編碼的蛋白質(zhì)共有195個(gè)氨基酸，與水稻、小麥和擬南芥的R40g3蛋白的氨基酸序列有較高的同

2、源性。對(duì)經(jīng)逆境處理的堿茅幼苗根、葉中該基因的表達(dá)分析結(jié)果表明，堿茅中Put-R40g3基因的表達(dá)有被ABA、鹽(NaCl、Na2CO3、 NaHCO3)和干旱誘導(dǎo)的趨勢。這個(gè)結(jié)果預(yù)示了Put-R40g3基因與逆境存在密切關(guān)系
　　利用與植物有類似代謝途徑的單細(xì)胞真核生物——酵母作為模型來研究Put-R40g3蛋白在細(xì)胞內(nèi)的位置及其在真核細(xì)胞中表達(dá)時(shí)所呈現(xiàn)出來的抗逆性。Put-R40g3蛋白與綠色熒光蛋白(GFP)融合在酵母細(xì)胞表達(dá)

3、的蛋白質(zhì)定位研究結(jié)果表明了Put-R40g3蛋白存在于細(xì)胞質(zhì)中。同時(shí)Put-R40g3基因在酵母中表達(dá)，使酵母在鹽(NaCl、Na2CO3、NaHCO3)、干旱及氧化逆境條件下提高了對(duì)逆境的適應(yīng)能力。
　　在轉(zhuǎn)基因擬南芥中，對(duì)獲得的能夠穩(wěn)定表達(dá)Put-R40g3基因的轉(zhuǎn)基因株系進(jìn)行鹽和干旱脅迫，結(jié)果顯示轉(zhuǎn)基因株系在逆境下的生根情況要優(yōu)于野生型擬南芥。此外，轉(zhuǎn)基因株系生長發(fā)育的形態(tài)有異于野生型，會(huì)在莖部或底部生長出一個(gè)或多個(gè)柄。這個(gè)