高糖高棕櫚酸培養(yǎng)對β細胞脂質含量及FAT-CD36基因表達的影響.pdf

1、目的: 研究高糖高棕櫚酸培養(yǎng)對β細胞內脂質含量以及脂肪酸轉位酶（FAT/CD36）基因表達的影響,探討FAT/CD36在β細胞脂質沉積和胰島素分泌缺陷中的作用。
　　 方法:
　　 1.NIT-1細胞分別給予5 mmol/L、10 mmol/L、15 mmol/L、20 mmol/L、25 mmol/L、30 mmol/L葡萄糖以及0 mmol/L、0.125 mmol/L、0.25 mmol/L、0.5 mmol/L棕

2、櫚酸培養(yǎng)24小時，逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）技術檢測細胞FAT/CD36的基因表達。根據RT-PCR檢測結果選取進一步分組實驗的最適葡萄糖濃度（25 mmol/L）和棕櫚酸濃度（0.25 mmol/L）。
　　 2.體外培養(yǎng)NIT-1細胞，分別以5 mmol/L葡萄糖（對照組，NC）、25 mmol/L葡萄糖（高糖組，HG）、0.25 mmol/L棕櫚酸＋5 mmol/L葡萄糖（高棕櫚酸組，HP）以及0.25 mmol/

3、L棕櫚酸＋25 mmol/L葡萄糖（高糖高棕櫚酸組，GP）培養(yǎng)24小時后，運用酶比色法測定細胞內甘油三酯（TG）含量；放射免疫分析法測定胰島素分泌；并以β-actin為內參照，RT-PCR方法檢測細胞 FAT/CD36 mRNA的表達水平。
　　 結果:
　　 1.不同濃度葡萄糖培養(yǎng)細胞24小時后，細胞FAT/CD36 mRNA水平呈濃度依賴性增高，當葡萄糖濃度增加至25 mmol/L時FAT/CD36 mRNA的表達水

4、平達到最高峰。但是，不同濃度棕櫚酸干預后，各組FAT/CD36 mRNA表達水平并無明顯差異。
　　 2.高糖、高棕櫚酸以及高糖加高棕櫚酸分別孵育細胞24小時后，與NC組比較，各處理組細胞內TG含量增加，而葡萄糖刺激的胰島素分泌(GSIS)下降，其中以GP組變化最顯著（P<0.01），且GP組與HG組（P<0.05）和HP組（P<0.01）之間的差異也有統(tǒng)計學意義。
　　 3.在高糖的孵育下，HG組和GP組FAT/CD3

5、6 mRNA表達顯著高于NC組（P<0.01），但無論是5 mmol/L還是25 mmol/L葡萄糖添加棕櫚酸后的各組與相應的單純葡萄糖組比較，F(xiàn)AT/CD36 mRNA表達均無明顯改變。
　　 結論:
　　 1.葡萄糖可促進β細胞FAT/CD36 mRNA的表達，后者的表達水平與葡萄糖的濃度有關，呈劑量依賴性。但棕櫚酸對FAT/CD36基因的表達卻無明顯影響。
　　 2.在高棕櫚酸的環(huán)境下，高糖可進一步促進β細