膽囊結(jié)石患者膽囊動(dòng)力學(xué)變化相關(guān)研究.pdf

1、第一部分：膽囊結(jié)石形成的膽囊動(dòng)力學(xué)研究
　　 目的：探討膽囊動(dòng)力學(xué)異常在膽囊結(jié)石形成中的作用，為明確保膽取石手術(shù)適應(yīng)證提供依據(jù)。
　　 方法：50例膽囊結(jié)石病人（病例組）和20例健康人（正常對(duì)照組），采用B超測(cè)定空腹膽囊壁厚度、空腹膽囊容積、餐后30min、60min、90min膽囊餐后殘余容積，計(jì)算膽囊排空容積EV、膽囊殘余指數(shù)RF和膽囊排空率E。病例組以正常對(duì)照組平均RF+2SD值（40.18％）為界限，分為膽囊收縮

2、“正?！苯M（n=12）和膽囊收縮“減弱”組兩個(gè)亞組（n=38）。
　　 結(jié)果:1）正常對(duì)照組膽囊壁厚度0.15+0.03cm，膽囊排空率（71.88±6.03）％。根據(jù)參數(shù)可信區(qū)間的計(jì)算方法，正常健康人膽囊壁厚度95％的可信區(qū)間為0.09～0.21 cm，膽囊排空率95％的可信區(qū)間為59.82％～83.94％。2）病例組膽囊壁厚度0.31±0.05cm，膽囊排空率（48.65±15.81）％，與正常對(duì)照組比較均有顯著差異（P<0

3、.05）。3）膽囊結(jié)石患者膽囊收縮“正常”組膽囊壁厚度0.28±0.05 cm，膽囊收縮“減弱”組膽囊壁厚度0.32±0.05 cm，與正常對(duì)照組比較，均有顯著差異（P<0.05），膽囊收縮“正?！苯M與膽囊收縮“減弱”組膽囊壁厚度比較也有顯著差異（P<0.05）。4）膽囊結(jié)石患者膽囊收縮“減弱”組與膽囊收縮“正常”組比較，雖然FV沒(méi)有明顯差異（P>0.05），但膽囊收縮“減弱”組最小殘余容積增大（P<0.05），膽囊排空率降低（P<0.

4、05）。膽囊結(jié)石患者膽囊收縮“正?！苯M與正常對(duì)照組比較，雖然排空率沒(méi)有明顯差異，但膽囊收縮“正?！苯M空腹膽囊容積明顯增大（P<0.05）。5）病例組膽囊結(jié)石患者的膽囊排空率與膽囊壁厚度二者呈顯著負(fù)相關(guān)，Y=106.695-185.270X，r=-0.617，P=0.000；對(duì)照組膽囊排空率與膽囊壁厚度二者無(wú)相關(guān)，Y=77.846-38.986X，r=-0.184，P=0.437。
　　 結(jié)論：膽囊排空障礙是膽囊結(jié)石形成的動(dòng)力學(xué)基

5、礎(chǔ)之一，為臨床用藥防止膽囊結(jié)石形成及復(fù)發(fā)、保膽取石術(shù)手術(shù)適應(yīng)證的選擇提供了理論依據(jù)。我們認(rèn)為保膽取石術(shù)應(yīng)具備的基本條件是膽囊排空率>50％，膽囊壁厚度≤0.3cm。
　　 第二部分：膽囊收縮素受體的分子生物學(xué)研究
　　 目的：探討膽囊結(jié)石患者膽囊收縮素（CCK）-A受體mRNA轉(zhuǎn)錄水平和受體分布、定位及蛋白表達(dá)水平。
　　 方法：50例膽囊結(jié)石患者（病例組）和20例無(wú)膽囊結(jié)石肝移植供體（供體組）膽囊標(biāo)本，采用RT

6、-PCR方法測(cè)定膽囊標(biāo)本CCK-A受體分子mRNA轉(zhuǎn)錄水平，采用酶免疫組織化學(xué)法研究膽囊CCK-A受體的分布和定位，測(cè)定膽囊標(biāo)本CCK-A受體分子蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:1）供體組膽囊CCK-A受體分子mRNA轉(zhuǎn)錄水平0.8182±0.0481，病例組mRNA轉(zhuǎn)錄水平0.6465±0.0910，兩組比較有明顯差異（P<0.01）。2）膽囊CCK-A受體分子不僅在膽囊平滑肌細(xì)胞表達(dá)，而且在腺上皮細(xì)胞也有明顯表達(dá)。蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)

7、胞中，細(xì)胞核與細(xì)胞漿均有表達(dá)。3）與供體組相比，病例組免疫組化染色5個(gè)高倍視野中腺上皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯減少，兩組比較有顯著差異（P<0.01）。4）供體組膽囊CCK-A受體分子蛋白表達(dá)水平（蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞總數(shù)）和mRNA轉(zhuǎn)錄水平呈正相關(guān)，Y=-458.027+975.883X，r=0.741，P=0.000；病例組膽囊CCK-A受體分子蛋白表達(dá)水平（蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞總數(shù)）和mRNA轉(zhuǎn)錄水平也呈正相關(guān)，Y=-43.

8、193+414.018X，r=0.644，P=0.000。
　　 結(jié)論:1）膽囊收縮素與膽囊CCK-A受體結(jié)合，不僅調(diào)節(jié)膽囊平滑肌收縮，而且還調(diào)節(jié)膽囊腺上皮細(xì)胞的分泌功能。2）膽囊CCK-A受體屬于胞核和胞質(zhì)受體（胞內(nèi)受體）。3）膽囊結(jié)石患者CCK-A受體分子mRNA轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達(dá)水平較低。4）膽囊結(jié)石患者膽囊CCK-A受體分子蛋白表達(dá)水平降低與mRNA轉(zhuǎn)錄水平下調(diào)是一致的。
　　 第三部分：膽囊收縮素受體表達(dá)水平對(duì)

9、膽囊收縮功能的影響
　　 目的：探討膽囊結(jié)石患者膽囊CCK-A受體分子mRNA轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達(dá)水平對(duì)膽囊收縮功能的影響。
　　 方法：同第二部分研究。
　　 結(jié)果:1）將病例組患者的兩個(gè)亞組（膽囊收縮“正常”組12例和收縮“減弱”組38例）進(jìn)行比較，膽囊收縮“減弱”組CCK-A受體mRNA轉(zhuǎn)錄水平顯著低于膽囊收縮“正?！苯M（0.6279±0.0900比0.7055±0.0680，P<0.01）；即使是膽囊收縮“

10、正?！钡哪懯』颊?，膽囊CCK-A受體mRNA轉(zhuǎn)錄水平也較無(wú)膽囊結(jié)石的供體組減少（0.7055±0.0680比0.8182±0.0481，P<0.01）。2）供體組20例，膽囊平滑肌細(xì)胞蛋白表達(dá)陽(yáng)性7例、強(qiáng)陽(yáng)性13例，而病例組50例，平滑肌細(xì)胞蛋白表達(dá)弱陽(yáng)性24例、陽(yáng)性22例、強(qiáng)陽(yáng)性4例，二者比較有顯著差異（P<0.01）。病例組和供體組膽囊平滑肌CCK-A受體蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)比較也有顯著差異（P<0.01）。將病例組的兩個(gè)亞組進(jìn)行比

11、較，膽囊收縮“減弱”組膽囊平滑肌CCK-A受體分子蛋白表達(dá)陽(yáng)性強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)顯著低于無(wú)膽囊結(jié)石的供體組（P<0.01）；即使是膽囊收縮“正常”的膽囊結(jié)石患者，膽囊平滑肌CCK-A受體分子蛋白表達(dá)陽(yáng)性強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)也較無(wú)膽囊結(jié)石的供體組低（P<0.05）。膽囊收縮“減弱”組和膽囊收縮“正常”組膽囊平滑肌CCK-A受體分子蛋白表達(dá)水平比較，表達(dá)陽(yáng)性強(qiáng)度有顯著差異（P<0.05），但蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)無(wú)差異（P>0.05）。3）病例組膽囊

12、CCK-A受體mRNA轉(zhuǎn)錄水平與膽囊壁厚度二者呈顯著負(fù)相關(guān)，Y=0.965-1.019X，r=-0.582，P=0.000；病例組膽囊平滑肌CCK-A受體蛋白表達(dá)水平（平滑肌蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞總數(shù)）與膽囊壁厚度二者呈顯著負(fù)相關(guān)，Y=193.784-246.306X，r=-0.419，P=0.002。4）病例組膽囊排空率與膽囊CCK-A受體mRNA轉(zhuǎn)錄水平二者呈顯著正相關(guān)，Y=-37.558+133.493X，r=0.778，P=0.000

13、；病例組膽囊排空率與膽囊平滑肌CCK-A受體蛋白表達(dá)水平（平滑肌蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞總數(shù)）二者呈顯著正相關(guān)Y=13.725+0.300X，r=0.587，P=0.000。
　　 結(jié)論：膽囊結(jié)石患者CCK-A受體分子mRNA轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達(dá)水平與膽囊壁厚度、膽囊排空率存在數(shù)量上的相關(guān)關(guān)系，CCK-A受體分子mRNA轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達(dá)水平的差異可能是影響膽囊收縮功能的關(guān)鍵因素。
　　 第四部分：膽汁膽固醇濃度對(duì)膽囊收縮素受體的

14、影響
　　 目的：探討膽囊結(jié)石患者膽汁膽固醇濃度對(duì)膽囊CCK-A受體分子mRNA轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達(dá)水平的影響。
　　 方法：采用酶法測(cè)定膽汁膽固醇濃度，其余方法同第二、三部分研究。
　　 結(jié)果:1）供體組膽汁膽固醇濃度6.68±1.75 mmol/L，病例組膽汁膽固醇濃度9.40±2.33mmol/L，二者比較有顯著差異（P<0.01）。將病例組患者的兩個(gè)亞組進(jìn)行比較，膽囊收縮“減弱”組膽汁膽固醇濃度顯著低于膽囊

15、收縮“正?！苯M，P<0.05，但膽囊收縮“正常”組膽汁膽固醇濃度和無(wú)膽囊結(jié)石的肝移植供體供體組比較，無(wú)顯著差異，P>0.05。2）膽囊壁厚度與膽汁膽固醇濃度二者呈顯著正相關(guān)，Y=0.186+0.014X，r=0.608，P=0.000。3）病例組膽囊排空率與膽汁膽固醇濃度二者呈顯著負(fù)相關(guān)，Y=98.686-5.314X，r=-0.795，P=0.000。4）供體組CCK-A受體mRNA轉(zhuǎn)錄水平與膽汁膽固醇濃度二者呈顯著負(fù)相關(guān)，Y=0.9

16、61-0.021X，r=-0.776，P=0.000；病例組CCK-A受體mRNA轉(zhuǎn)錄水平與膽汁膽固醇濃度二者也呈顯著負(fù)相關(guān)，Y=0.934-0.031X，r=-0.786，P=0.000。5）供體組膽囊CCK-A受體總蛋白表達(dá)水平（腺上皮和平滑肌細(xì)胞蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞總數(shù)）與膽汁膽固醇濃度呈負(fù)相關(guān)，Y=523.268-27-358X，r=-0.757，P=0.000：病例組膽囊CCK-A受體總蛋白表達(dá)水平（腺上皮和平滑肌細(xì)胞蛋白表達(dá)陽(yáng)性

17、細(xì)胞總數(shù)）與膽汁膽固醇濃度也呈負(fù)相關(guān)，Y=365.440-15.000X，r=-0.599，P=0.000。6）供體組膽囊平滑肌CCK-A受體蛋白表達(dá)水平（平滑肌蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)）與膽汁膽固醇濃度呈負(fù)相關(guān)，Y=301.824-19.120X，r=-0.667，P=0.001；病例組膽囊平滑肌CCK-A受體蛋白表達(dá)水平（平滑肌蛋白表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)）與膽汁膽固醇濃度也呈負(fù)相關(guān)，Y=190.866-7.887X，r=-0.603，P=0.00

18、0。
　　 結(jié)論:1）膽囊結(jié)石患者的膽汁膽固醇濃度高于無(wú)膽囊結(jié)石的人，尤其是膽囊收縮功能差的膽囊結(jié)石患者，膽汁膽固醇濃度明顯升高。2）膽囊的慢性炎癥與膽汁膽固醇濃度有關(guān)。3）無(wú)論是膽囊結(jié)石患者，還是非膽囊結(jié)石的肝移植供體，膽囊CCK-A受體分子mRNA轉(zhuǎn)錄水平和蛋白表達(dá)水平隨著膽汁膽固醇濃度的高低而下調(diào)或上調(diào)，表明膽汁膽固醇可能是膽囊收縮功能障礙的始動(dòng)因素，降低膽汁高膽固醇濃度可以促進(jìn)膽囊動(dòng)力功能的恢復(fù)，為預(yù)防結(jié)石的形成或復(fù)發(fā)提