益母草堿對急性心肌梗死及梗死后心衰影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:益母草堿是中藥益母草的主要有效成分之一，前期研究表明其具有一定的心臟保護(hù)作用。本研究通過結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支制備急性心肌梗死和長期梗死致心衰的動物病理模型，觀察益母草堿對急性心肌梗死造成的心肌細(xì)胞損害和心功能的影響，并從心肌細(xì)胞凋亡以及細(xì)胞外基質(zhì)的角度探討其改善梗死后心衰及心室重構(gòu)的作用機(jī)制。
　　方法:1.采用結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支的方法制備急性心肌梗死模型，冠脈結(jié)扎前一周各組動物按相應(yīng)劑量腹腔注射藥物，術(shù)后繼續(xù)腹腔

2、注射給藥2天后（共給藥10天），TTC染色法檢測并計(jì)算心肌梗死面積，測定大鼠血漿中乳酸脫氫酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的含量，檢測血漿中SOD活性及MDA水平。
　　2.采用長期心肌梗死致心衰大鼠模型，灌胃給予藥物干預(yù)6周后，行心臟超聲學(xué)檢查檢測心功能改變，觀察大鼠體重變化并計(jì)算全心濕重、肺重與體重比值，ELISA方法測定血漿中血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)和醛固酮(ALD)水平，并通過RT-PCR和Western blot的方法觀察

3、益母草堿對凋亡相關(guān)因子Bax、Bcl-2及基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-2的mRNA表達(dá)和蛋白的影響。
　　結(jié)果:1.(1)與假手術(shù)組比較，心梗模型組的心肌梗死面積顯著增加，3個(gè)給藥組處理后左心室梗死面積不同程度降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。(2)與假手術(shù)組比較，心梗模型組血漿中LDH及CK的含量均顯著升高(P＜0.01);與心梗模型組比較，3個(gè)給藥組均能明顯降低心梗大鼠血漿中LDH、CK的含量，減輕LDH和CK的細(xì)胞漏出率。(3

4、)與假手術(shù)組比較，心梗模型組血漿中CuZn-SOD活力的變化沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，T-SOD活力下降明顯（P＜0.05），而血漿中MDA含量在心肌缺血后顯著性升高（P＜0.01）;3個(gè)給藥組處理后均能明顯升高血漿中T-SOD的活性，同時(shí)不同程度降低血漿中MDA水平（P＜0.05），CuZn-SOD活力仍然沒有明顯變化。
　　2.(1)與假手術(shù)組比較，心力衰竭模型組EF、FS、LVAW、LVPW等指標(biāo)顯著降低（P＜0.05），表明冠脈結(jié)扎

5、6周后大鼠左心室收縮功能明顯降低而且左室結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，3個(gè)給藥組治療后并沒有明顯改善其心臟形態(tài)和功能。(2)與假手術(shù)組比較，心衰模型組大鼠體重(BW)無明顯變化，全心濕重(HW)、肺重(Lung Weight)、心重指數(shù)(HW/BW)、肺重指數(shù)(Lung Weight/BW)顯著增加（P＜0.05），Leo30mg/kg和Cap陽性藥組的HW、Lung Weight、Lung Weight/BW較心衰模型組明顯降低（P＜0.05），表明

6、益母草堿高劑量能明顯減輕心臟肥大和肺淤血，并降低肺重指數(shù)。(3)與假手術(shù)組比較，心肌缺血后心衰模型組血漿中AngⅡ和ALD含量明顯升高;3個(gè)給藥組處理后血漿中AngⅡ水平和ALD水平較模型組顯著降低（P＜0.05）。(4) Leo30mg/kg能增加梗死區(qū)Bcl-2蛋白表達(dá)，下調(diào)Bax蛋白表達(dá)，并下調(diào)心室重構(gòu)相關(guān)的MMP-2蛋白表達(dá)，與心衰模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Leo30mg/kg對Bax、Bcl-2 mRNA的表達(dá)與其對蛋白表達(dá)的影

7、響趨勢大致相同。Leo30mg/kg還可抑制MMP-2在心臟梗死組織中的表達(dá)，與心衰模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:1.益母草堿通過減小心肌梗死面積，降低心肌酶譜活性從而達(dá)到保護(hù)心肌細(xì)胞膜的完整性，對急性缺血造成的心肌損傷有良好的預(yù)防性保護(hù)作用，其作用機(jī)制與提高心肌組織抗氧化能力有關(guān)。2.益母草堿通過降低神經(jīng)內(nèi)分泌激素釋放以阻斷AngⅡ和ALD激活的下游相關(guān)途徑，從而預(yù)防或減緩急性心肌梗死后的心室重構(gòu)。同時(shí)益母草堿還通過降低心