酸提菜籽餅粕多糖的研究.pdf

1、菜籽餅粕是油菜籽榨油加工后的副產(chǎn)品,替代部分飼用蛋白或作為肥料使用,沒有食用、藥用價值。本文詳細(xì)、系統(tǒng)地研究了菜籽餅粕中的有用成分-酸提菜籽多糖,通過多種提取和分離技術(shù),分別獲得了分子量大于100KDa級分(RAPT)、亞級分(RAPT-Ⅱ)和介于100KDa與50Kda組分(RAPF)。采用多種化學(xué)分析及現(xiàn)代儀器分析技術(shù),初步確定了組分RAPT-Ⅱ的化學(xué)結(jié)構(gòu),并對其進(jìn)行了體內(nèi)、體外生物活性的初步評價。
　　 1、采用5因子二次

2、正交旋轉(zhuǎn)設(shè)計,研究了酸濃度、料液比、提取時間、提取溫度、提取次數(shù)等5因素對從菜籽餅粕中用酸提取多糖得率的影響,用SAS8.0中響應(yīng)面分析程序RSREG建立并分析了5因素對得率的函數(shù)模型。結(jié)果表明,所得回歸方程達(dá)顯著水平,擬合情況良好；5因素對得率的影響大小依次為提取溫度＞提取次數(shù)＞提取時間＞酸濃度＞料液比,最佳提取溫度為100℃,提取次數(shù)4～5次,提取時間(每次)1.4～1.8小時,酸濃度0.10～0.14mol/L,料液比1:18～1

3、:22,菜籽餅粕酸提多糖得率在3.1％以上。
　　 2、酸提菜籽多糖粗品經(jīng)AB8大孔樹脂處理,得到初步純化的菜籽多糖RAP,蛋白脫除率達(dá)87.9％。RAP經(jīng)超濾分級得到2個級分,分子量大于100KDa的RAPT和分子量大于50KDa的RAPF,RAPT和RAPF組分得率分別為42.14％和45.59％；RAPT再經(jīng)DEAE-SephadexA-25柱分離,獲得相應(yīng)主要亞級分RAPT-Ⅱ得率約為67.4％。RAPT-Ⅱ經(jīng)Sepha

4、dexG-200柱和濾紙電泳鑒定,為相對均一多糖。
　　 RAPF,RAPT,RAPT-Ⅱ均為白色絮狀的非淀粉多糖；中性糖含量分別為45.6％,42.5％和71.4％；糖醛酸含量分別為31.3％,25.7％和20.3％；蛋白質(zhì)含量分別為11.2％,17.5％和4.4％。GPS法測定RAPT-Ⅱ的重均分子量為8.59×105Dal。
　　 通過紫外光譜、紅外光譜掃描、高效液相色譜、氨基酸分析、β-消除反應(yīng)、高碘酸氧化反應(yīng)以

5、及剛果紅試驗(yàn)分析RAPT-Ⅱ的結(jié)構(gòu),初步認(rèn)為:菜籽多糖RAPT-Ⅱ主要由果糖、甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、巖藻糖及己糖醛酸組成,糖鏈主要由β-糖苷鍵連接,含有蛋白質(zhì)。
　　 3、研究酸提菜籽多糖各級分的抗氧化作用。用K3[Fe(CN)6]與H2O2/Fe2+體系評價酸提菜籽多糖的還原能力及清除羥基自由基(.OH)的能力；用比色法分析酸提菜籽多糖對小鼠紅細(xì)胞氧化溶血的影響；用丙二醛(MDA)試劑盒測定MDA

6、的生成量,用比色法測定小鼠肝線粒體腫脹度。結(jié)果顯示,在化學(xué)模擬體系中,酸提菜籽多糖具有還原能力及清除羥基自由基(.OH)的能力。在體外,酸提菜籽多糖具有抑制小鼠紅細(xì)胞溶血,抑制小鼠肝組織勻漿及肝線粒體MDA的生成和肝線粒體腫脹的作用,劑量-效應(yīng)關(guān)系明顯。在體內(nèi),灌胃酸提菜籽多糖組小鼠(200mg·kg-1·d-1,10d)與對照組相比,肝勻漿MDA的降低均達(dá)到極顯著水平,血清SOD活力和GSH-PX活力平均值的升高均達(dá)到極顯著水平(P＜