丁酸鈉對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U-251的放射增敏作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的:觀察組蛋白去乙?；种苿┒∷徕c對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U-251放射增敏作用，并探討其對(duì)射線導(dǎo)致的DNA雙鏈斷裂修復(fù)過程的影響以及這一過程中可能涉及的分子機(jī)制。
　　 方法:MTT法檢測(cè)NaB對(duì)U-251的細(xì)胞毒性；克隆形成法觀察NaB對(duì)U-251放射敏感性的影響；采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)以及Western-Blot檢測(cè)不同濃度NaB(0～5mmol/L)對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞U-251的Ku-70mRNA及蛋白表達(dá)的影響；采

2、用免疫細(xì)胞化學(xué)法，檢測(cè)3mmol/LNaB預(yù)處理過的U-251在受到總量為2 Gy的X線單次照射后胞核內(nèi)γ-H2AX熒光焦點(diǎn)的動(dòng)態(tài)變化特點(diǎn)。
　　 結(jié)果:NaB對(duì)U-251的毒性呈劑量依賴性，IC50值約為16mmol/L；3mmol/L(20[％]IC50)NaB處理組細(xì)胞在受到不同劑量X線(0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy)照射后細(xì)胞的存活率、D0值和Dq值均少于單純照射組(P<0.05)，放射增敏比(SER)為1.2

3、3；NaB作用于U-251后顯著降低了細(xì)胞內(nèi)Ku70的mRNA和蛋白表達(dá)水平(P<0.05)；NaB處理組細(xì)胞受2 GyX線照射后，于 0h、0.5h、8h及24h各時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)胞核內(nèi)γ-H2AX的熒光焦點(diǎn)數(shù)母分別為2、60、28和13個(gè)，均大于單純照射組于各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)到的焦點(diǎn)數(shù)：0、42、16和2個(gè)(P<0.05)。
　　 結(jié)論:組蛋白去乙酰化抑制劑NaB可以通過抑制輻射后DNA雙鏈斷裂修復(fù)基因Ku70的表達(dá)，降低腫瘤細(xì)胞對(duì)