豆甾烷-3-酮-21-羧酸體外成骨活性的研究.pdf

1、玉柏石松為石松科石松屬植物，在我國傳統(tǒng)的中醫(yī)藥中，被用于治療關(guān)節(jié)疼痛和骨折，但其治療骨折的藥理學(xué)機制尚不清楚。本實驗選用從玉柏石松中分離得到的甾體化合物豆甾烷-3-酮-21-羧酸（stigmastan-3-one-21-oic acid，以下簡稱SA）為實驗材料，研究其對體外培養(yǎng)小鼠成骨細胞MC3T3-E1活性的影響。
　　本研究的主要內(nèi)容有：
　　(1) SA對MC3T3-E1增殖率的影響。
　　(2) SA對MC3

2、T3-E1堿性磷酸酶活性的影響。
　　(3) SA對MC3T3-E1體外礦化的影響。
　　(4) SA對MC3T3-E1成骨分化相關(guān)基因mRNA表達的影響。這些基因包括：
　　a) AP-1家族基因（Fos亞家族：c-fos、Fra-1、Fra-2；Jun亞家族：Jun-D）。
　　b)成骨細胞早期分化相關(guān)基因：Runx-2、Osterix。
　　c)成骨基質(zhì)蛋白基因：堿性磷酸酶ALP、I型膠原Col-I、

3、骨橋蛋白OPN、骨涎蛋白BSP、骨鈣蛋白OCN。
　　Alamar Blue實驗結(jié)果表明：SA對MC3T3-E1細胞的增殖無明顯影響。
　　SA對成骨細胞ALP活性研究實驗的結(jié)果顯示：8μmol/L和16μmol/L的SA處理細胞8天能抑制成骨細胞堿性磷酸活性。
　　茜素紅染色結(jié)果表明：SA處理細胞16天能提高骨細胞礦化水平。
　　熒光定量PCR結(jié)果顯示：SA抑制成骨早期分化相關(guān)基因（Runx-2和Osterix