降粘抗栓片Ⅲ號(hào)對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)機(jī)制研究.pdf

1、研究背景及目的：
　　缺血性腦血管病是危害人類健康的常見(jiàn)疾病之一，由于其具有高致病率、高致殘率、高死亡率和高復(fù)發(fā)率等特點(diǎn)，日益受到人們的重視。雖然，目前臨床以早期溶栓為最理想的治療手段，然而部分患者在溶栓治療后出現(xiàn)病情惡化，使得人們對(duì)該療法的安全性提出了質(zhì)疑，并引起了對(duì)腦缺血再灌注損傷在治療缺血性腦血管病中的作用的密切關(guān)注。所以，如何減輕缺血性再灌注損傷，更為有效地改善缺血性腦血管病患者的機(jī)體運(yùn)動(dòng)功能障礙成為目前研究的熱點(diǎn)。

2、>　　近年來(lái)研究表明，腦缺血再灌注損傷與氧自由基的產(chǎn)生、能量代謝障礙、興奮性氨基酸的毒性作用、鈣超載及基因表達(dá)的改變等機(jī)制密切相關(guān)，其中，因氧自由基具有高度活性，缺血缺氧時(shí)體內(nèi)產(chǎn)生大量的自由基，易與細(xì)胞膜上的不飽和脂肪酸反應(yīng)，形成脂質(zhì)過(guò)氧化物，破壞生物膜，從而引起機(jī)體一系列的連鎖反應(yīng)，造成神經(jīng)元的損害，加重機(jī)體的功能障礙，故自由基的氧化損傷成為腦缺血再灌注損傷的核心病理環(huán)節(jié)。
　　中藥復(fù)方降粘抗栓片Ⅲ號(hào)（JNKSTⅢ）是在益氣活血

3、的治療原則指導(dǎo)下，結(jié)合多年臨床實(shí)踐建立起來(lái)的復(fù)方制劑。既往臨床觀察發(fā)現(xiàn)，其可通過(guò)改善患者的血液流變學(xué)狀況，來(lái)對(duì)缺血性腦血管病產(chǎn)生防護(hù)或治療作用。同時(shí)長(zhǎng)期運(yùn)用該藥對(duì)患者機(jī)體運(yùn)動(dòng)功能障礙的改善具有一定的療效。目前關(guān)于該復(fù)方的具體作用機(jī)制尚未進(jìn)行相關(guān)研究。本實(shí)驗(yàn)即在此基礎(chǔ)上，采用線栓法制備大鼠腦缺血再灌注損傷模型，擬從抗自由基氧化損傷角度來(lái)初步探討JNKSTⅢ的腦保護(hù)機(jī)制，以期為其更廣泛地應(yīng)用于缺血性腦血管疾病的防護(hù)、減輕缺血再灌注損傷提供可

4、靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　研究方法及內(nèi)容：
　　1．健康雄性SD大鼠96只，體質(zhì)量225～250g，隨機(jī)分為6組，每組各16只：正常對(duì)照組，模型組，尼莫地平片組，JNKSTⅢ低劑量組、中劑量組和高劑量組。各藥均以10mL/kg的標(biāo)準(zhǔn)配制成懸濁液。降粘抗栓片Ⅲ號(hào)組分別按0.36、1.08、3.24g/(kg·d)給藥；尼莫地平片組按6mg/(kg·d)給藥；模型組灌以等量蒸餾水，連續(xù)灌胃給藥7d。于第8d采用線栓法造模。模型組及各給

5、藥組缺血2h后再灌注24h。
　　2．對(duì)各組實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分、血流變學(xué)測(cè)定、TTC染色法測(cè)定腦梗死區(qū)體積，同時(shí)，進(jìn)行血清及腦組織中的SOD、MDA及LDH的活性或含量的測(cè)定以及腦組織缺血區(qū)HSP70的免疫組化染色。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　1．神經(jīng)行為學(xué)：與模型組對(duì)照，各給藥組均可明顯改善缺血再灌注大鼠的神經(jīng)行為學(xué)障礙（p＜0.05），且以JNKSTⅢ高劑量組和尼莫地平組療效更為明顯。
　　2．血液流變學(xué)：

6、JNKSTⅢ中、高劑量組能降低腦缺血再灌注損傷大鼠的全血粘度及纖維蛋白原含量，提高紅細(xì)胞變形能力，與模型組相比有明顯改善（p＜0.05或p＜0.01）。
　　3．腦梗死體積：模型組大鼠腦組織出現(xiàn)明顯的梗死，各給藥組均可明顯減小梗死體積（p＜0.05），且以JNKSTⅢ高劑量組和尼莫地平組作用更為明顯。
　　4．血清及腦組織中的SOD、MDA及LDH的測(cè)定：腦缺血再灌注后，大鼠血清中的SOD值降低，LDH、MDA值顯著升高；腦

7、組織中的SOD值降低，MDA值升高，而JNKSTⅢ能明顯逆轉(zhuǎn)上述變化，且該作用有一定的量-效關(guān)系。
　　5．用免疫組化染色法檢測(cè)缺血區(qū)腦組織中的HSP70表達(dá)：與模型組對(duì)照，各給藥組的HSP70表達(dá)均增加，且以JNKSTⅢ高劑量組和NIMO組增加更為明顯（p＜0.05）。
　　結(jié)論與提示：
　　1．JNKSTⅢ在腦缺血再灌注損傷過(guò)程中，可通過(guò)改善血液流變學(xué)和抗氧自由基損傷來(lái)改善缺血再灌注大鼠神經(jīng)行為學(xué)癥狀，減少再灌注損