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文檔簡介
1、肺癌是目前最常見的惡性腫瘤之一,對人類健康的危害日益嚴重。目前,80%的肺癌患者就診時己屬晚期,失去了手術(shù)根治的機會,放療化療效果不佳,5年生存率低;而早期肺癌手術(shù)后5年生存率雖然較高,但肺癌發(fā)病隱匿,早期確診率低,故肺癌總的預后不良,與肺癌缺乏有效的早期診斷手段有關(guān)。臨床上急需建立快速、簡便、易于為患者接受、且準確可靠的肺癌無創(chuàng)診斷新方式。尋找敏感性,特異性高的早期診斷方法是目前臨床亟待解決的問題。
與此同時,目前臨床應(yīng)
2、用的病理分期模式,并不能有效評估可手術(shù)的非小細胞肺癌患者接受手術(shù)治療后疾病進展情況,特別是臨床上常可觀察到某一特定亞組的患者,術(shù)后在較短時間內(nèi)出現(xiàn)復發(fā)或轉(zhuǎn)移,影響患者預后,而用傳統(tǒng)的理論及檢測手段尚無法作出合理的解釋,因此也為患者術(shù)后制定個體化的治療方案帶來困難。
生物標志物是生理及病理狀態(tài)下可度量的生物指標,可用于表征疾病危險程度,疾病的發(fā)生與發(fā)展;生物質(zhì)譜技術(shù)作為目前定量蛋白質(zhì)組學的核心技術(shù),對癌癥生物標志物的研究具有
3、極大的推動作用,為解答上述臨床疑問,滿足上述臨床需求帶來了希望的曙光。
在第一部分的研究中,我們采用肺癌細胞株(A549)細胞內(nèi)蛋白質(zhì)組作為定量對照,對癌細胞的各種分泌蛋白質(zhì)進行質(zhì)量控制與評測,結(jié)果顯示該創(chuàng)新性研究策略可有效降低細胞內(nèi)蛋白質(zhì)對分泌蛋白質(zhì)組的污染,從而篩選出高質(zhì)量、癌細胞特異性的分泌蛋白質(zhì)組。我們進一步篩選并驗證了Plasminogen activatorInhibitor1(PAI-1)與C4b-bindi
4、ng protein(C4BP)這兩種蛋白質(zhì)在非小細胞肺癌患者與正常人血清中的表達差異。結(jié)果顯示該研究策略有助于發(fā)現(xiàn)由癌細胞分泌產(chǎn)生的肺癌候選生物標志物。
在第二部分的研究中,我們以靶向定量的質(zhì)譜技術(shù)研究肺癌血清生物標志物,在探索階段,通過隨訪得到肺癌患者接受根治性手術(shù)治療后疾病進展及生存數(shù)據(jù),根據(jù)預后的異質(zhì)性進行患者亞群分類,并根據(jù)性別、年齡、吸煙史、病理分期等因素進行配對研究,使用鳥槍法非標記定量技術(shù),篩選出預后相關(guān)差
5、異表達蛋白質(zhì)。在驗證階段,采用多重反應(yīng)檢測技術(shù)(nultiple reaction monitoring,MRM)以及酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)分別對肺癌患者血清中的靶蛋白質(zhì)進行絕對定量研究。結(jié)果顯示:SAA(Serumamyloid A protein)、LRG1(Lericine-rich alpha-2-glycoprotein)與C4BP這三種血清蛋白質(zhì)可作為
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