養(yǎng)陰益氣、布津通絡(luò)法對(duì)干燥綜合征小鼠干預(yù)作用及機(jī)理研究.pdf

1、干燥綜合征（Sjogren's syndrome，SS）是一種侵犯外分泌腺體尤以唾液腺和淚腺為主的慢性自身免疫性疾病。導(dǎo)師汪悅教授根據(jù)長(zhǎng)期的臨床經(jīng)驗(yàn)，運(yùn)用養(yǎng)陰益氣、布津通絡(luò)法治療SS，方用增液布津湯在臨床取得良好效果，本文通過實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)一步探討?zhàn)B陰益氣、布津通絡(luò)法治療SS的作用機(jī)制，為臨床工作提供充實(shí)的依據(jù)。 目的： 探討中醫(yī)學(xué)對(duì)原發(fā)性干燥綜合征發(fā)病機(jī)理的認(rèn)識(shí)，從基礎(chǔ)研究角度探討?zhàn)B陰益氣、布津通絡(luò)法對(duì)干燥綜合征小鼠干預(yù)作

2、用及免疫功能影響，并從組織和細(xì)胞學(xué)角度探討增液布津湯對(duì)干燥綜合征小鼠AQP5的表達(dá)影響，為闡明運(yùn)用養(yǎng)陰益氣、布津通絡(luò)法治療原發(fā)性干燥綜合征小鼠的作用機(jī)制提供依據(jù)，從而在證實(shí)其確切療效的同時(shí)明確其作用部位，為更好地運(yùn)用于臨床提供理論與實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 1.理論研究方法：檢索古今中外文獻(xiàn)對(duì)干燥綜合征認(rèn)識(shí)，并進(jìn)行分析比較。 2.實(shí)驗(yàn)研究方法：實(shí)驗(yàn)研究部分用BALB/c小鼠頜下腺免疫造成SS小鼠模型，同時(shí)給予增液布津湯

3、。在8周的實(shí)驗(yàn)中，每周測(cè)定唾液流量，每4天測(cè)定體重、攝食量、飲水量。取胸腺和頜下腺計(jì)算胸腺指數(shù)和頜下腺指數(shù)，并觀察頜下腺病理變化。并用流式細(xì)胞儀測(cè)定外周血CD4+/CD8+，ELIST法測(cè)定血清IFN-γ、IL-1、IL-6含量，計(jì)算IFN-γ/IL-6。用免疫組化法檢測(cè)小鼠頜下腺AQP5的分布表達(dá)變化。 結(jié)果： 1.理論研究結(jié)果：在文獻(xiàn)資料分析的基礎(chǔ)上，結(jié)合導(dǎo)師汪悅教授的臨床經(jīng)驗(yàn)，認(rèn)為：由于燥熱之邪導(dǎo)致陰津耗傷，津能載

4、氣，氣隨津耗，則氣陰兩虛是大多數(shù)pSS病人的共同轉(zhuǎn)歸，因此確立養(yǎng)陰益氣、布津通絡(luò)為治療大法，根據(jù)氣能生津、氣能行津的原則，重用養(yǎng)陰益氣藥，運(yùn)用增液布津湯治療pSS，取得良好的效果。 2.實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果： 2.1,在癥狀表現(xiàn)上，與正常小鼠相比，模型小鼠唾液流量減少、體重減輕、飲水量增加。而增液布津湯大、中、小劑量組均能不同程度改善小鼠口渴癥狀。 2.2,在免疫功能方面，與正常小鼠相比，模型組頜下腺指數(shù)降低、胸腺指數(shù)增

5、加，T、B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化增殖能力比值增加、頜下腺出現(xiàn)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)等病理變化，CD4+/CD8+增加，而給予增液布津湯能改善這些癥狀并減輕病理改變. 2.3,細(xì)胞因子IFN-γ、IL-1、IL-6變化情況。結(jié)果顯示：與模型組比較，細(xì)胞因子IFN-γ、IL-1、IL-6在增液布津湯作用下，IL-1、IFN-γ與模型組比較顯著降低，其中小劑量組降低明顯P<0.01。給予藥物后IL-6也有不同程度降低，各組間IL-6無顯著性差異。

6、 2.4,對(duì)AQP5的影響。我們又研究養(yǎng)陰益氣、布津通絡(luò)對(duì)小鼠頜下腺細(xì)胞AQP5的影響。通過比較研究，顯示：增液布津湯能改善小鼠頜下腺細(xì)胞AQP5的表達(dá)，與國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究有類似之處，但也有相異之處。 結(jié)論： 1.增液布津湯具有抑制小鼠腺體淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)、抑制T、B淋巴細(xì)胞增殖、改善CD4+/CD8+比值，能夠糾正免疫紊亂。 2.增液布津湯可能通過抑制細(xì)胞因子IL-6、IFN-γ蛋白合成及分泌，間接地抑制了Th細(xì)胞的

7、分化與增殖，從而緩解SS小鼠頜下腺淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，通過調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞因子失衡來保護(hù)SS小鼠，進(jìn)一步說明細(xì)胞因子在SS唾液分泌過程中發(fā)揮重要作用。 3.增液布津湯能改變小鼠頜下腺細(xì)胞AQP5分布表達(dá)，與唾液分泌功能有關(guān)，因此為增液布津湯治療SS提供了依據(jù)。 創(chuàng)新點(diǎn)： 首次從氣陰兩虛的角度，研究養(yǎng)陰益氣、布津通絡(luò)法對(duì)SS小鼠干預(yù)作用及其機(jī)理，得出該治法通過調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞亞群、Th1/Th2細(xì)胞因子失衡，改變頜下