低溫去合金化NiTi形狀記憶合金生物相容性評價(jià).pdf

1、目的：1.探討兔真皮干細(xì)胞(Dermis stem cells，DSCs)的體外分離培養(yǎng)和鑒定方法，初步對其生長特性進(jìn)行研究，并為生物組織工程提供一種新的種子細(xì)胞及成熟的分離鑒定方法。2.將分離培養(yǎng)的第2代真皮干細(xì)胞與表面低溫去合金化處理后NiTi記憶合金共培養(yǎng)，為NiTi記憶合金表面低溫去合金化處理后材料的醫(yī)學(xué)生物相容性進(jìn)行初步評價(jià)。 方法：1.以新生新西蘭大白兔為研究對象，機(jī)械法直接分離得到真皮組織，采用酶消化法獲取細(xì)胞，利

2、用干細(xì)胞貼壁粘附生長的特性獲取高克隆細(xì)胞群，并進(jìn)行傳代篩選。應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞周期，免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測細(xì)胞表面分子的表達(dá)。2.以表面低溫去合金化處理后NiTi記憶合金作為研究對象，模擬體內(nèi)環(huán)境，進(jìn)行生理鹽水和PBS接觸角測定，溶血率、動(dòng)態(tài)凝血時(shí)間，血小板粘附試驗(yàn)。將真皮干細(xì)胞和表面低溫去合金化處理后NiTi記憶合金共培養(yǎng)，繪制真皮干細(xì)胞生長曲線，原子吸收光度計(jì)培養(yǎng)液鎳離子濃度測定，羥脯氨酸測定。 結(jié)果：原代培養(yǎng)的兔真皮細(xì)胞

3、經(jīng)過連續(xù)傳代培養(yǎng)至第3代，細(xì)胞形態(tài)均一。流式細(xì)胞儀細(xì)胞周期分析顯示，在體外培養(yǎng)第3天％G1=55.8，％S=34.6。免疫細(xì)胞化學(xué)顯示：細(xì)胞表面波形蛋白(vimentin)、CD34表達(dá)陽性，細(xì)胞角蛋白19(cytoKeratinl9)、Ⅷ因子和巢蛋白(nestin)表達(dá)陰性。PBS表面低溫去合金化處理后接觸角平均為57.6°，粘附血小板數(shù)量少，形態(tài)正常，羥脯氨酸測定顯示細(xì)胞在NiTi形狀記憶合金表面低溫去合金化處理后生長正常，原子吸收