冠心舒通膠囊對抗動脈粥樣硬化可能機制的動物實驗研究.pdf

1、動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是動脈壁上聚集了許多脂質(zhì)顆粒、胞外基質(zhì)纖維和炎癥細胞及炎癥因子的一種慢性炎癥性疾病，是引起冠心病、某些腦血管病的病理基礎(chǔ)，隨著飲食結(jié)構(gòu)、生活習慣的變化，越來越多的年輕人過早的出現(xiàn)了動脈粥樣硬化的病變。在祖國醫(yī)學的理論中，可將動脈粥樣硬化病變歸結(jié)于“痰瘀互結(jié)”，隨著抗AS的藥物研究的不斷的深入，中醫(yī)藥抗AS取得了明確的效果，其優(yōu)點在于其調(diào)理能力強，而副作用又較小，不會產(chǎn)生藥物依賴性，在：

2、
　　1）調(diào)節(jié)血脂代謝的環(huán)節(jié)。
　　2）保護血管內(nèi)皮細胞功能方面。
　　3）抗炎癥反應(yīng)的作用上。
　　4）以及穩(wěn)定斑塊等方面發(fā)揮著突出的作用。
　　目前存在的問題是，中藥抗動脈粥樣硬化的動物實驗雖多，但是缺乏規(guī)范化，缺乏在深層機制層面的闡述研究。冠心舒通膠囊主要用于口服治療冠心病心絞痛，在臨床應(yīng)用中取得了良好的效果，但是其抗AS的作用和相關(guān)機制還未曾研究。為了制備動脈粥樣硬化模型，本課題擬采用高膽固醇飼料喂

3、養(yǎng)Wistar大鼠加注維生素D1，以及高脂飼料喂養(yǎng)載脂蛋白E基因敲除小鼠（ApoE-/-小鼠），通過灌服冠心舒通膠囊，分別檢測其血脂及血液流變學的指標，血管內(nèi)皮功能和炎癥反應(yīng)的指標，以及AS斑塊穩(wěn)定性及大小，來初步闡述其在體內(nèi)預防和治療動脈粥樣硬化的途徑。
　　實驗一：
　　研究方法：32只雄性Wistar大鼠，首先適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，后隨機平均分為正常組（NC）、正常+冠心疏通膠囊藥物組（NG）、高脂組（HG）、高脂+冠心舒通

4、膠囊藥物組（GG），共4組，每組8只。正常組及正常+藥物組給予普通飼料，高脂組及高脂+藥物組給予高脂飼料，給藥組灌胃給予冠心舒通膠囊，按1.8g/kg，1次/d，連續(xù)8周；實驗結(jié)束后，將大鼠麻醉，直視下心臟穿刺取血,一部分立即送臨床檢驗科檢測血脂兩項：TC，TG；以及血液流變學指標（全血粘度，紅細胞聚集指數(shù)，屈服應(yīng)力），另一部分于實驗室內(nèi)ELESIA法測定血LDL、NO、ET-1、MDA等指標，Western-blot法測定血管組織VC

5、AM-1表達情況，胸主動脈中段冰凍切片，HE染色查看血管大體病變情況。
　　研究結(jié)果：4組Wistar大鼠喂養(yǎng)8周后，HG組大鼠血管組織在光學顯微鏡下觀察，出現(xiàn)明顯病變，內(nèi)皮增厚、內(nèi)皮下組織結(jié)構(gòu)明顯異常，出現(xiàn)空泡，血管平滑肌層破壞嚴重，與NC組差異明顯。而GG組的大鼠血管病變則較輕，血液標本檢驗顯示冠心舒通膠囊膠囊可強有力對抗模型大鼠TC和TG的升高、和LDL的上升（P＜0.05），而對正常喂養(yǎng)大鼠的血脂則無明顯影響；并可通過降低

6、血液粘稠度，增加紅細胞的變形能力，降低紅細胞的聚集指數(shù)等（P＜0.05）從而改善血液流變學的各項指標，血漿NO與ET-1，以及MDA檢測HG組與GG組差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。蛋白質(zhì)印跡法檢測血管組織VCAM-1的表達，可以看出冠心舒通膠囊有效抑制了AS血管的炎癥反應(yīng)。
　　實驗二：
　　研究方法：30只8周齡ApoE-/-小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)，12weeks后，(高脂飼料配方為：15％脂肪，0.25％膽固醇，84.75％

7、基礎(chǔ)飼料)分為單純高脂喂養(yǎng)組（HF），高脂喂養(yǎng)+冠心舒通膠囊高劑量（1.8g/Kg/天）灌服組(HH)，高脂喂養(yǎng)+冠心舒通膠囊低劑量（0.6g/Kg/天）灌服組(HL)。12周后取各組ApoE小鼠主動脈中段分別行油紅染色查看大體病變情況；Immunofluorescence method染色檢測MMP-9于血管的表達情況。
　　研究結(jié)果：3組ApoE-/-小鼠12w后，油紅染色標本，AS斑塊著紅色，與模型組相比，主動脈AS斑塊冠心