兩相體系中甾體微生物轉(zhuǎn)化研究.pdf

1、微生物轉(zhuǎn)化在當(dāng)前甾體激素藥物的生產(chǎn)中具有重要應(yīng)用意義。傳統(tǒng)生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)在水相中進(jìn)行，而甾體在水介質(zhì)中溶解度極低，經(jīng)常受到可利用底物的限制。有機(jī)介質(zhì)中甾體微生物轉(zhuǎn)化成為近年來(lái)生物轉(zhuǎn)化領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一。
　　 依西美坦(exemestane)是一種不可逆的甾體芳香化酶抑制劑，結(jié)構(gòu)與天然雄烯二酮底物相似，是治療絕經(jīng)后婦女激素依賴(lài)型乳腺癌的一種有效的藥物，其臨床應(yīng)用日益廣泛。傳統(tǒng)的制備方法是以全化學(xué)工藝合成，而依西美坦合成最重要的一步

2、C1,2位脫氫時(shí)要使用DDQ等大量有毒有害化學(xué)試劑，且產(chǎn)物較難分離。本文采用有機(jī)介質(zhì)中微生物轉(zhuǎn)化的方法，對(duì)甾體C1,2位的生物脫氫進(jìn)行了研究。
　　 實(shí)驗(yàn)中考察了正己烷，正庚烷，二氯甲烷，氯仿，甲苯，二甲苯，乙酸乙酯，乙酸丁酯8種不同有機(jī)溶劑中甾體底物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的溶解度。通過(guò)對(duì)甾體溶解度的測(cè)定，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯，乙酸丁酯，甲苯，二甲苯、氯仿對(duì)甾體的溶解度較大，初步選定作為兩相體系中的有機(jī)相組成。然后通過(guò)探究這5種有機(jī)溶劑對(duì)簡(jiǎn)單節(jié)桿菌

3、細(xì)胞存活率的影響，其中二甲苯對(duì)微生物細(xì)胞存活率影響最小，確定了以二甲苯作為兩相體系中的有機(jī)相組成。同時(shí)還研究了兩相中的水相組成以及有機(jī)溶劑的加入量，確定了直接以發(fā)酵液作為水相，有機(jī)溶劑加入量在總體積比的15％較為合適。
　　 在二甲苯/發(fā)酵液兩相體系中，以甾體雄甾-4-烯-6-亞甲基-3，17-二酮為底物，利用簡(jiǎn)單節(jié)桿菌(Arthrobacter simplex)完整細(xì)胞對(duì)甾體A環(huán)C1,2位進(jìn)行生物脫氫，從而得到抗腫瘤藥物依西美